运用PET技术研究智三针对AD大鼠脑功能代谢的影响

本课题拟采用D-半乳糖腹腔注射结合双侧海马注射淀粉样蛋白A、鹅膏蕈氨酸IBO建立阿尔茨海默病(Alzheimers＇disease,AD)复合大鼠模型，以" 智三针"为治疗方法，运用PET技术观察针刺智三针穴所激活的靶效应脑区，并进一步对不同脑区进行相关蛋白表达测定，反向验证靶效应脑区，并在此基础上，运用基因芯片技术，筛选针刺智三针穴疗效相关靶效应脑区的信号通路。旨在多角度，多靶点进行智三针治疗AD的中枢机制研究，为临床推广应用 "智三针"治疗AD及阐明针灸治疗AD获效机制奠定实验和理论基础。

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）是一种常见于老年人的中枢神经系统退行性疾病，以进行性的认知障碍、记忆障碍及精神病性症状等为主要表现。研究显示针灸能够有效地改善AD患者的学习记忆能力、精神神经症状等。“智三针”由神庭穴、双侧本神穴组成，主要用于智力低下、精神障碍、记忆障碍等。随着脑科学发展，将脑功能成像技术用于探究针刺治疗脑相关疾病的中枢机制成为热点。本课题采用D-gal腹腔注射结合双侧海马注射Aβ1-40建立AD大鼠模型。分为正常组、模型组、智三针组、非穴组。研究分为①运用PET技术观察针刺智三针穴所激活的靶效应脑区；②采用免疫组化观察针刺对AD大鼠皮质区、海马区GLUT-3、ChAT、SOD、NO蛋白表达的影响。③采用Agilent大鼠全基因组表达谱芯片（Agilent Whole Rat Genome Oligo Microarray, 4×44K）进行靶效应脑区差异表达基因筛选、基因功能分析（GO）及KEGG通路分析。主要：①运用Y迷宫全天总反应时间（TRT）评估大鼠学习记忆能力：造模后，模型大鼠的TRT较正常组均延长（P＜0.05），4周治疗后，与模型组、非穴组比较，智三针组大鼠TRT缩短（P＜0.05），提示造模使大鼠的学习记忆损伤；针刺智三针穴能提高AD大鼠的学习记忆能力。②采用micro-PET/CT成像技术观察针刺AD大鼠的靶效应脑区：与正常组比较，模型组在嗅球、前边缘皮层、纹状体、顶叶联合皮层、视觉皮层等脑区葡萄糖代谢降低；与模型组、非穴组比较：智三针组在终纹床核、下丘脑、中脑脑脚、中脑被盖等脑区葡萄糖代谢增加。提示：智三针对上述脑区具有激活效应。③采用免疫组化观察针刺对AD大鼠皮质ChAT、GLUT3蛋白表达及海马区SOD、NO表达的影响。结果提示智三针提高AD学习记忆能力的机制可能与升高脑内ChAT、GLUT3、SOD表达及降低NO表达有关。④基因芯片分析：采用Agilent大鼠全基因组表达谱芯片（Agilent Whole Rat Genome Oligo Microarray, 4×44K）进行大鼠下丘脑差异表达基因筛选、基因功能分析（GO）及KEGG通路分析。部分检测试验仍在进行，数据分析暂未完成。