piRNA-36011在人胶质瘤干细胞中的表达及作用

piRNA是与PIWI蛋白结合的非编码小RNA，参与生殖系干细胞自我更新。人类piRNA-36011的前体SnaR-A在人类肿瘤中高表达。高级别胶质瘤恶性程度高，复发与放化疗抵抗与肿瘤干细胞密切相关。根据生殖干细胞与肿瘤干细胞生物学行为的联系，我们提出：piRNA-36011在人类胶质瘤中高表达，且在胶质瘤干细胞中优势表达，PIWI-piRNA途径对肿瘤干细胞"干性"具有维持作用。本课题以piRNA-36011为中心，研究piRNA-36011在人类胶质瘤和胶质瘤干细胞中的表达情况与临床意义，确定与piRNA-36011相结合的PIWI家族成员，深入研究干预piRNA-36011对胶质瘤干细胞生物学行为的影响，寻找piRNA-36011调控的下游基因和影响的干细胞相关信号通路及凋亡信号通路。探索piRNA-36011作为胶质瘤治疗靶点的意义。

piRNA是与PIWI蛋白结合的非编码小RNA，参与生殖系干细胞自我更新。人类piRNA-36011的前体SnaR-A在人类肿瘤中高表达。本课题前期研究发现piRNA-36011在多种肿瘤细胞株中表达，结合生殖干细胞与肿瘤干细胞生物学行为相似性，本课题提出：piRNA在人类胶质瘤中高表达，且在胶质瘤干细胞中优势表达，PIWI-piRNA途径对肿瘤干细胞“干性”具有维持作用。. 本课题以piRNA-36011为中心，研究了piRNA-36011在人类胶质瘤和胶质瘤干细胞中的表达情况与临床意义，结果证实了piRNA-36011在人类最常见的胶质瘤-弥漫浸润性星形细胞瘤中的阳性率和表达丰度高于正常脑组织，且随级别增高表达丰度增加，但差异不显著。生存分析显示，piRNA-36011低表达组患者的疾病特异生存时间（DSS）时间和无进展生存时间(PFS)均长于高表达组，说明piRNA-36011低表达组患者预后好于高表达组。本课题进一步发现在胶质瘤U251细胞株中，U251肿瘤干细胞中piRNA-36011的表达丰度明显高于普通U251细胞，说明胶质瘤中表达piRNA-36011的主要是肿瘤干细胞，该RNA分子定位于肿瘤细胞浆中发挥作用。通过应用反义寡核苷酸技术干扰piRNA-36011的作用，本课题发现干扰后U251肿瘤干细胞生成次代肿瘤球的能力下降、肿瘤集落形成能力下降、凋亡增加、干细胞标志物Sox2表达降低，证实了piRNA-36011对维持U251肿瘤干细胞的自我更新能力起重要作用，本部分内容已总结并撰写论文，投往国际期刊。本课题尝试了解与piRNA-36011相结合的PIWI家族分子，通过对U251肿瘤干细胞中PIWI家族mRNA检测发现，Piwil2和Piwil4在U251肿瘤干细胞中阳性表达，说明与piRNA-36011结合的可能为这两种PIWI家族分子。