FBW7/ARF6调控hENT1的溶酶体途径降解影响胰腺癌对吉西他滨化疗敏感性的机制研究

Gemcitabine alone and gemcitabine-based combination regimens are generally accepted as the standard chemotherapeutic choice for pancreatic cancer. We previously demonstrated that hENT1 played an important role in impacting on the chemotherapeutic response of gemcitabine in pancreatic cancer. Further studies indicated that FBW7 was involved in protein level regulation and membrane localization of hENT1 by lysosomal degradation pathway to influence the chemosensitivity of gemcitabine in pancreatic cancer. Based on our previous study about the protein interactions, we speculated that ARF6 might work as a connected molecular between FBW7 and lysosome degradative hENT1 by mediating the “membrane to lysosome” translocation of hENT1. Thus, we suggest that there is a new molecular mechanism as an axis of FBW7/ARF6/hENT1 to take effect. We are going to carry out some researches to disturb this functional axis by in vitro and in vivo assays and validation of clinical specimens, which could help effectively predicting the chemoresistance and serve as a potential therapeutic target in pancreatic cancer.

以吉西他滨为基础的单药或联合方案是目前胰腺癌化疗的首选。我们前期证明，hENT1是影响胰腺癌对吉西他滨化疗敏感性的一个重要分子；深入研究发现，FBW7能通过溶酶体降解途径影响hENT1的蛋白水平及细胞膜定位，进而影响胰腺癌对吉西他滨的化疗敏感性；基于蛋白-蛋白相互作用分析及前期研究提示，我们又推测ARF6介导了hENT1的“细胞膜－溶酶体”转位，是FBW7通过溶酶体降解途径调控hENT1表达的中间分子，由此提出“FBW7/ARF6/hENT1”这一新的通路。针对这一通路，我们拟进一步开展体内外和临床样本的验证及干预研究，为临床上胰腺癌化疗耐药提供干预和预测的潜在靶点。

以吉西他滨为基础的单药或联合方案是目前胰腺癌化疗的首选，但胰腺癌对化疗的耐药以致疗效一直不令人满意，亟须开展有针对性的基础研究并寻求应对的策略。本研究实时跟踪吉西他滨耐药相关研究最新动态，为此我们开展了为改善化疗耐药的分子机制探索。包括：（1）、结合前期研究报导的FBW7可以影响胰腺癌吉西他滨化疗耐药，以及FBW7的泛素化底物、c-Myc是胰腺癌细胞内ARF6转录的调控因子，进一步发现FBW7可以通过调控ARF6转录进而影响hENT1的细胞定位，证实“FBW7/ARF6/hENT1”通路这一新分子机制。（2）、通过体外细胞实验发现，ARF6与hENT1相互作用形成功能复合体，进而FBW7通过调控ARF6表达，影响hENT1的“细胞膜－溶酶体”转位，参与吉西他滨的化疗耐药。（3）、收集我院临界可切除性胰腺癌患者100例制作组织芯片，检测FBW7、ARF6以及hENT1在癌和癌旁的表达，通过临床病理参数分析以及预后生存分析，明确“FBW7/ARF6/hENT1”通路与胰腺癌预后密切相关，是吉西他滨化疗患者预后分析的独立预测因素。综上，通过以上研究阐明胰腺癌吉西他滨化疗耐药潜在的分子机制，为胰腺癌化疗增敏的个体化治疗提供重要实验依据，相关数据已整理完毕，论文已完成并投稿。同时在本项目的资助下，为寻找更多潜在的增敏化疗的有效靶点，研究还进一步探讨了胰腺癌吉西他滨化疗耐药相关、包含小分子RNA在内的其他分子机制，并发表SCI论文13篇。为此，本项目研究团队在探索增加胰腺癌吉西他滨化疗敏感性，以期待研发新的个体化抗肿瘤药物方面提供了新的思路和理论基础。