脑创伤后乳凝集素在血脑屏障继发性损伤中的保护作用及机制的研究

The damage and open of blood brain barrier (BBB) after traumatic brain injury (TBI) is one of the key factors leading to the secondary injury, and its mechanism is complex. Previous studies in our research group found that the release of brain-derived microvesicles (BDMV) after TBI could cause blood brain barrier to be opened. Our study (Blood, 2018) found that injection of Lactadherin could reduce the secondary blood brain barrier damage in TBI mice, but the mechanism is still not clear. Lactadherin has been proved to be an apoptotic cell scavenger protein. Therefore, it is reasonable to speculate that Lactadherin can have some influence on TBI mice directly or indirectly to reduce secondary blood brain barrier damage. This project intends to use mice TBI model to investigate the function of Lactadherin in TBI mice model: ① the correlation between blood brain barrier and traumatic brain injury; ② the effect of lactadherin on blood brain barrier damage in TBI mice is a direct effect or indirect effect; ③ the time and dose of intervention of exogenous lactadherin in reducing blood brain barrier damage of TBI mice. This study will explore the role and mechanism of lactadherin in reducing blood brain barrier secondary injury after TBI, and find an effective intervention measure for reducing blood brain barrier secondary injury, to provide a new idea for improving the prognosis of TBI .

颅脑创伤（TBI）后的血脑屏障（BBB）损害开放是导致脑水肿等继发性损伤的关键因素。课题组前期研究证实，TBI后释放的脑源性微囊泡（BDMV）可导致BBB开放；申请人进一步研究（Blood，2018）发现：注射具有清除BDMV作用的凋亡细胞清除蛋白乳凝集素（Lact）的小鼠在TBI后BBB继发性开放显著减少，但机制尚不明确。有理由推测：Lact在TBI后BBB的损害与保护中发挥重要作用。本项目拟借助小鼠TBI模型和体外BBB模型探讨：①BDMV、Lact与TBI后BBB开放的相关性；②Lact对TBI后BBB开放的影响是间接通过增加BDMV清除，或直接作用于BBB相关细胞结构从而减少BBB开放；③外源性Lact早期干预减少TBI后BBB损害的时间与剂量关系。本研究将探讨Lact在减少TBI后BBB继发性损伤中的作用及机制，探索TBI后BBB继发性损伤的干预措施，为TBI的治疗提供新思路。

颅脑外伤后血脑屏障（BBB）的损伤开放是多种继发性损伤发生、发展的一个重要环节。BBB 破坏引起的继发性损伤既是颅脑外伤后引起的一系列损害的结果，又是导致全身凝血功能障碍、肺组织纤维性渗出、脑水肿、颅内压增高和脑卒中等导致患者病情继续恶化的重要因素。研究表明脑源性微囊泡（BDMV) 的释放是导致 BBB 继发性损伤的关键因素，是TBI预后不良甚至致残的重要原因之一。BDMV可以通过破坏的BBB释放入外周循环血中发挥一系列的病理生理作用，同时发现 BDMV 可以协同血小板促进BBB开放，导致 BBB 通透性增加。TBI 后创伤区释放的 BDMV 可以进一步导致BBB 的继发性损伤，并通过受损的 BBB 进入循环血产生一系列病理生理作用。乳凝集素（Lactadherin）蛋白能够做为一个桥梁将高表达磷脂酰丝氨酸（PS）的凋亡细胞与巨噬细胞联系起来，增加凋亡细胞及其分解产物的清除速率。本课题组研究通过伊文思蓝渗漏等实验发现 Lactadherin蛋白能减少BBB渗漏，减少 TBI 小鼠的死亡率，增加外周血中 BDMV 的清除。Lactadherin蛋白除了能通过增加 BDMV 的清除减少 BBB 的继发性损伤，而且还可能通过直接作用于 BDMV 或 BBB 减少 TBI 后 BBB 的继发性损伤开放。本课题通过研究1.TBI 后小鼠体内创伤性BDMV、Lactadherin 蛋白水平动态变化及其与BBB的损伤关系。2.BDMV对体外BBB开放的作用和Lactadherin 蛋白对这一作用的影响及其机制的研究。3.外源性Lactadherin干预减少TBI后BBB开放的小鼠动物模型观察；探明了:1）TBI 后小鼠创伤性BDMV的释放与 Lactadherin蛋白水平负相关，且Lactadherin蛋白水平动与BBB损伤渗漏也呈负相关。2）Lactadherin蛋白可通过①直接阻断创伤性BDMV的相关功能；②增加体内 BDMV 的清除；③直接作用于BBB相关的细胞及其结构；减少BBB的开放。3）外源性增加Lactadherin可减少 TBI 后BBB的损伤开放。为治疗 TBI 后 BBB继发性损伤寻找到一种可能可行的新方法。