金福安汤通过调控p120ctn途径干预肺癌转移的实验研究

肺癌难治的根源在于肿瘤细胞的恶性生物学行为-侵袭与转移。p120ctn是新发现的与肿瘤细胞粘附、浸润、转移相关的连环蛋白，与肺癌转移之间存在密切联系。如能针对p120ctn这个新靶点进行干预，必将对肺癌的防治产生重大意义。中医学认为痰瘀与肿瘤的侵袭和转移密切相关，中药复方金福安汤是全国名老中医邓铁涛教授治疗肺癌的经验方，具有化痰祛瘀的功效。前期临床研究证实金福安汤有较好的防治肺癌转移，延缓肺癌发展的作用，并能改善患者血液流变学状态，其机制是否通过影响p120ctn及相关的Rho GTP酶，值得进一步探讨。本研究探讨金福安汤在体外实验中对p120ctn磷酸化及小鼠肺腺癌LA795细胞生物学行为的影响；在动物实验中对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织p120ctn表达的影响以及与RhoA、Cdc42表达的关系，从连环蛋白的角度揭示金福安汤抑制肺癌转移的机制，为发现防治肺癌转移的新靶点药物提供科学依据。

肺癌难治的根源在于肿瘤细胞的恶性生物学行为—侵袭与转移。p120ctn是新发现的与肿瘤细胞粘附、浸润、转移相关的连环蛋白，与肺癌转移之间存在密切联系。本研究分为体外实验和动物实验两部分。体外实验部分培养人肺腺癌A549细胞，分为空白对照组，金福安汤低、中、高剂量组、环磷酰胺组，分别给予含空白血清和含药血清培养液干预。MTT法检测金福安汤对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用；刺激A549细胞磷酸化后，用免疫沉淀和Western Blot法检测金福安汤含药血清对p120ctn的作用；观察金福安汤对p120ctn磷酸化的A549细胞黏附和迁移作用。结果显示金福安汤具有明显的抑制人肺癌A549细胞增殖的作用，呈剂量相关性；中剂量金福安汤组A549细胞p120ctn磷酸化程度较空白对照组显著降低（p＜0.05）；中、高剂量金福安汤组A549细胞的黏附能力较空白对照组高（p＜0.05），金福安汤各剂量组A549细胞的迁移能力较空白对照组下降（p＜0.05）。证实金福安汤具有抑制A549细胞增殖的作用；对A549细胞p120ctn磷酸化有一定的抑制作用，可能是干预A549细胞生物学行为的作用机制。动物实验部分将50只Lewis肺癌荷瘤小鼠分为金福安汤低、中、高剂量组、环磷酰胺组、生理盐水组；计算各组小鼠平均瘤体质量、抑瘤率、肺表面转移灶及抗转移率；采用免疫组化法检测各组Lewis肺癌小鼠的p120ctn表达以及RhoA、Cdc42表达。结果金福安汤各剂量组与CTX组的瘤体质量均小于生理盐水对照组的瘤体质量，其中中剂量金福安汤组及CTX组与生理盐水组对照差异具有统计学意义（p<0.05）。中、高剂量金福安汤组及CTX组小鼠的肺转移灶数明显少于生理盐水组（p<0.01或p<0.05）。中剂量金福安汤组中p120ctn、RhoA、Cdc42的异常表达细胞数均少于生理盐水对照组（p<0.01）。提示金福安汤具有抑制小鼠Lewis肺癌生长及转移的作用，其机理可能与通过抑制120ctn的异位表达，进而抑制RhoA和Cdc42的异常表达相关。