草鱼MHCⅡ类基因遗传多态及抗病功能的研究

草鱼是我国的主要淡水养殖品种之一，但其成活率低，抗病性差。本项目拟以草鱼为研究对象，应用比较基因组学的有关原理，采用RT-PCR、PCR-SSCP、克隆测序、RACE等技术，克隆草鱼MHCⅡ类经典基因（DAA、DAB）和非经典基因,探讨其基因结构、遗传进化机制与剪切机制；通过对草鱼的攻毒实验，应用荧光实时定量等技术，分析草鱼的经典MHCⅡ类基因的在组织中表达丰度，并探讨抗病性的强弱与等位基因组成差异；通过构建多克隆载体，对DAA和DAB基因进行原核表达，采用SDS-PAGE、ELISA和Western blot等技术制备多克隆抗体。本研究阐明草鱼MHCⅡ类基因的遗传结构、进化机理和分子免疫机制具有重要的意义，并为进一步开展淡水鱼类的免疫遗传、抗病育种以及疾病预防铺垫一定的基础。