中药血必净注射液对重症中暑发生发展过程中肠道保护作用及机制研究

In China, the mortality of severe heatstroke with MODS was up to 35%. The research group proposed the "second critical point" theory in 2011--based on the cooling, the preventions and treatments of inflammation induced by SIRS and MODS were the second critical point for treatments of severe heatstroke. In the previous study, we have found that: 1, The initiating organ of SIRS and MODS--injury of intestinal during heatstroke was significant, and the barrier function was also weakened; 2, various inflammatory mediators in this process varied significantly, such as IL-1β, TNF-αet al; 3, representative molecules were preliminary screened: HMGB1,occludin,ZO-1and FBP. Previous studies found that: Xuebijing injection had effects of endotoxin antagonisting, inflammation inhibiting, et al. Our recent clinical observation also found that, Xuebijing can significantly reduce mortality in patients with severe heatstroke; Xuebijing can significantly alleviate the degree of liver damage and inhibit secretory function of KUFF cells in rats with heatstroke. But, during heatstroke process, the protective effects and mechanisms of Xuebijing in gut has not been reported. In this study, we observed animals with heatstroke, intestinal cell model and clinical patients, and comprehensively analyzed the protective effects and mechanisms of Xuebijing in gut during heatstroke process, this would be the theoretical basis for clinical application of Xuebijing.

我国重症中暑合并MODS死亡率高达35％。课题组所在单位2011年提出中暑“第二关键点”理论，即在降温基础上，对炎症引起的SIRS和MODS进行防治是治疗的“第二关键点”。并在前期研究中发现：1）SIRS和MODS发生的始动器官——肠道在中暑时损伤明显、屏障功能减弱；2）多种炎症介质如IL-1β和TNF-α等在此过程中变化显著；3）初步筛选出具有代表性的分子：HMGB1、occludin、ZO-1和FBP。既往研究发现：血必净注射液具有拮抗内毒素，抑制炎症等作用。课题组近期临床观察也发现，应用血必净可显著降低重症中暑患者死亡率；予中暑大鼠血必净治疗能明显缓解肝脏损伤程度，抑制枯否细胞分泌功能。然而，血必净在中暑时的肠道保护作用和机制尚未见报道。因此，本研究拟进一步以热打击动物、肠道细胞模型和临床患者为研究对象，全面分析血必净在中暑过程中的肠道保护作用及机制，为血必净的临床应用奠定理论基础。

重症中暑是一种高死亡率的疾病，严重威胁着人民的健康。其治疗策略主要包括降温治疗和防止SIRS、MODS治疗，后者在降低病死率上的作用更为突出。肠道作为体内最大的“储菌库” 和“内毒素库”，是 SIRS 和 MODS 的始动器官及靶器官，在中暑的发生、发展中具有重要作用。课题组前期研究发现1、热打击后大鼠肠道会出现明显病理变化；2、血必净对重症中暑具有良好的调控炎症效果，保护心脑肺肾多个脏器功能。然而，血必净是否具有肠道保护作用及相关机制尚无研究报道。因此，本课题在前期成功构建热打击模型的基础上，通过一系列实验，首先发现了血必净能够抑制热打击模型内毒素入侵，减轻炎症反应，而且血必净可以通过SIRT1-HSF1途径促进肠道连接蛋白occludin和ZO-1的表达，进而改善热打击后肠粘膜屏障完整性，除此之外，我们还探索性发现血必净可能通过改变肠道菌群结构影响氧化应激反应过程，从而影响肠道通透性。在细胞水平上，我们发现了血必净处理热打击后的SW480细胞通透性发生改变，同样发现了血必净可以影响细胞连接蛋白的表达，在机制上发现了血必净可能通过缓解肠粘膜氧化应激反应，促进 Sirt1表达，导致 HSF1去乙酰化，引起 Occludin 蛋白表达上调，以维持肠道屏障功能。在临床研究方面，通过病例对照研究，初步证实了血必净在改善重症中暑症状，保护肝脏、肾脏、凝血功能，降低脓毒症发生率上有一定作用；而且，血必净有助于控制全身炎症反应；最后我们还发现补充益生菌群能够提升血必净治疗重症中暑的临床疗效。通过以上研究，一方面证实了血必净对重症中暑的肠道保护作用和机制，另一方面也发现肠道菌群及代谢物对于维持肠道粘膜屏障功能具有重要作用。这一研究结论对于制定重症中暑的临床治疗方案提供了重要的理论依据，具有一定的指导价值。