ROR作为竞争性内源RNA调控胰腺癌干细胞转录因子OCT4机制及淸胰化积方干预研究

The cancer stem cells (CSCs) hypothesis assumed that CSCs are essential for cancer metastasis. Recent studies have indicated that long non-coding RNA (lncRNA) is involved in the multiple biological processes, including carcinogenesis. ROR is a competitive endogenous RNA that plays an important regulatory role in the pathogenesis and progression of cancer. While the lncRNAs that participate in cancer progression remain unknown. Our previous studies found QYHJ formula inhibit pancreatic cancer stem cells (PCSCs), but also reduced long non-coding RNA ROR and tumor stem cell nuclear transcription factors OCT4; at the same time, we found that ROR is specific for OCT4, but how ROR regulates OCT4 then affecting the cancer stem cells will need further study. In this project, it is designed to construct PCSC/ROR RNAi cells to explore the role of ROR in pancreatic cancer stem cells. Then to verify the outcomes in vitro experiment, subcutaneous xenograft model and liver metastasis model will be established to investigate the different regulative effect of QYHJ on potency of pancreatic cancer stem cells with different expression status of ROR. The project will investigate the mechanism of patients' survival with tumor by QYHJ formula treatment and also provide with new idea and the therapeutic target for pancreatic cancer by traditional Chinese medicines.

肿瘤干细胞理论认为肿瘤干细胞是引起肿瘤复发转移的根本原因,非编码RNA对肿瘤干细胞干性维持和诱导肿瘤细胞分化发挥着重要的作用。已有研究证实ROR可作为竞争性内源RNA可以影响细胞凋亡、信号通路和肿瘤转移侵袭等诸方面。本课题组前期研究发现清胰化积方明显抑制胰腺癌干细胞分化，而且能下调长链非编码RNA ROR和肿瘤干细胞核转录因子OCT4表达；同时，内在机制研究发现lncRNA-ROR对OCT4具有特异性调控作用，但lncRNA-ROR通过何种途径调控OCT4进而影响肿瘤干细胞则需要进一步深入研究。因此，本研究以lncRNA-ROR对胰腺癌肿瘤干细胞转录因子OCT4调控作用为切入点，明确其对胰腺癌干细胞自我更新、分化、侵袭、转移及耐药等影响，探索胰腺癌患者清胰化积方治疗后长期带瘤生存的内在机制，将对诠释中医药抗肿瘤治疗中带瘤生存现象提供新思路和新方法。

肿瘤干细胞假说认为，肿瘤的发生、发展起源于存在于体内的一小部分肿瘤干细胞（Cancer stem cell， CSC）。非编码RNA是CSC细胞干性维持和诱导肿瘤细胞分化所必须的，CSC相关核转录因子表达高低与肿瘤患者预后有着密切的联系。先前研究提示，肿瘤干细胞的自我更新、多向分化受到长链非编码RNA (Long non-coding RNA， lncRNA)的调控。已有研究证实，lncRNA-ROR与多种恶性肿瘤进展有关，但lncRNA-ROR与胰腺癌的关系尚未见报道，值得深入研究。中医药在肿瘤治疗历史悠久且发挥独特作用，具有改善患者生存质量、延长临床病人生存期的作用。.LncRNA-ROR属于lncRNA的亚类中的一员。LncRNA-ROR起始阶段在诱导多能性干细胞产生过程中被鉴定出来，在 iPSC产生过程中上调，可以受到 SOX2、OCT4和NANOG等转录因子的调控。临床样本检测提示lncRNA-ROR在胰腺癌患者的组织样本中表达量相对癌旁组织较高，这预示着lncRNA-ROR以原癌基因的角色功能在胰腺癌中发挥着的作用；在随后的体外研究中，在 Bxpc-3和Capan-1胰腺癌细胞系分选出的PCSC中外源沉默 lncRNA-ROR 可以诱导肿瘤干细胞在增殖、侵袭、转移、克隆成球等方面受到抑制。这一切结果使得我们推测 lncRNA-ROR可能在胰腺癌发生发展进程中扮演者着重要角色。.因此，以lncRNA-ROR对胰腺癌干细胞核转录因子Nanog的调控作用为切入点，明确其对胰腺癌干细胞自我更新、分化、侵袭、转移及成瘤等特性的重要影响，明确清胰化积方有效成分并探索经胰腺癌患者治疗后长期带瘤生存的机理的临床价值和科学意义，将为科学诠释中医药抗肿瘤治疗中带瘤生存现象提供新的借鉴。