蛋白激酶A对血小板凋亡的调控作用及其机制研究

Platelets play an important role in regulation of the numbers and functions of circulating platelet, and in the development of some platelet-related diseases. Protein kinase A (PKA) is highly expressed in platelet and is critical in platelet functions. Although there is evidence indicating that PKA is involved in the regulation of apoptosis in nucleated cells, it is still unclear whether PKA plays a role in platelets apoptosis. This proposal is aimed at investigating the roles and mechanisms of PKA in platelets apoptosis. Platelet apoptosis will be assessed by flow cytometry, platelet function will be analyzed using western bolt, RNA interference, Co-Immunoprecipitation and platelet aggregation. This proposal will provide novel insight into the mechanism for PKA in regulating platelet numbers and functions, which will help to understand the regulation of platelet function under physiological and pathological states and to develop a novel strategy for treatment of thrombotic and haemostatic diseases.

血小板凋亡不仅是自身清除的一种方式，而且在出血与血栓性疾病的发生发展过程中起重要调控作用。蛋白激酶A（Protein kinase A, PKA）是血小板信号转导中重要的调控蛋白。目前研究证实，PKA参与调控有核细胞的凋亡。然而，PKA是否参与调控血小板的凋亡，尚不清楚。我们的初步实验结果提示，抑制血小板内PKA活性可以诱导血小板发生凋亡。本研究将以正常人和鼠的血小板为研究对象，从分子、细胞以及动物整体等多个水平，究证明PKA在血小板凋亡中的作用并探讨其调控机制。本研究将不仅为血小板的基础研究提供资料，而且还将对认识病理、生理情况血小板功能和数量的调控机制，以及研制新型抗血栓、出血药物提供新思路。

近年来对血小板凋亡的研究越来越被重视，因为其揭示血小板寿命和生存的神秘。众多证据表明，病理和生理条件下细胞凋亡内在程序性的导致血小板破坏。然而，对于血小板的凋亡是如何开始的，人们却知之甚少。我们团队研究发现，原发性血小板减少性紫癜、糖尿病和菌血症病人的血小板和衰老的血小板都会出现蛋白激酶A（PKA）活性下降，而且PKA通过调控BAD 155位点丝氨酸的磷酸化调控血小板凋亡。体内实验显示，抑制PKA活性出现急性血小板减少现象。PKA激活剂可明显逆转血小板储存或模拟生理诱导剂引起的血小板凋亡和清除的现象。因此，本研究提示PKA作为重要的稳定调控蛋白，调控生理或病理情况下血小板的“生或死”。本研究将不仅为血小板的基础研究提供资料，有助于血栓与出血性疾病发病机制的认识和新的防治措施研究，成果还可能用于血栓、出血性疾病药用价值的探讨。