预防羔羊和犊牛大肠杆菌性腹泻的基因工程菌苗的研究

对ST基因进行了亚克隆，构建成功能表达ST免疫原性的基因工程菌株DH5a（pXST1），在国际上首次克隆了产气荚膜梭菌中国标准株的β-毒素基因并测定其DNA序列，构建了含有β-毒素基因的重组质粒pECB2；继而，在国际上首次将产气荚膜梭菌β-毒素基因与大肠杆菌的ST前体蛋白基因融合，成功构建携带能表达β-毒素和ST肠毒素融合蛋白的CPB-ST融合基因的基因工程菌株BL21(DE3)(pECB-ST)。该重组毒素融合蛋白的表达量占菌体蛋白的49.6%。通过免疫原性试验、安全性试验、攻毒保护试验和应用示范试验，表明构建成功的基因工程重组菌株BL21（DE3）（pECB-ST）可以作为预防由产气荚膜梭菌β-毒素与大肠杆菌ST肠毒素引起的幼畜腹泻的双价基因工程苗的生产菌株。