PCOS胰岛素抵抗状态下卵巢差异表达miRNA的筛选及其对CYP17基因的调控

既往研究提示PCOS患者的高胰岛素血症促进了高雄激素血症的发生。我们前期采用高通量和定性定量的RNA组学检测技术的研究发现：合并胰岛素抵抗的PCOS患者卵巢组织中某些差异表达的miRNA可能直接或间接通过启动子GATA-6调控雄激素合成关键酶CYP17基因的表达。当这些miRNA下调时，对其靶基因 CYP17或GATA-6的抑制作用减弱，可能导致雄激素合成增加。基于上述基础，进一步分别通过转导miRNA或其抑制分子，下调或升高靶细胞内特定的miRNA水平，在体外培养系统中观察其对GATA-6/CYP17的调控，并检测其对靶细胞分泌雄激素的影响。为阐述PCOS患者高雄激素血症发生的生物学机制提供新线索，并为干预雄激素合成提供新的基因靶点。

高胰岛素血症/胰岛素抵抗与高雄激素血症是多囊卵巢综合征（PCOS）的两大基本病理特征。目前尚缺乏以中国女性为研究对象、大样本量的研究报道证实高胰岛素血症和高雄激素之间的关系。本课题组通过对大样本量、多指标联合的临床资料分析发现，高胰岛素血症与高雄激素血症之间存在密切关系。而其具体的分子机制尚不清。既往研究显示胰岛素抵抗状态下胰岛素靶器官、组织的miRNA表达谱会发生改变；且卵巢miRNAs的正确表达对卵泡发育、激素合成等至关重要。因此我们推测胰岛素抵抗状态下卵巢的miRNAs表达谱可能存在改变，且这些改变可能参与卵巢性激素合成的调控。我们对PCOS胰岛素抵抗状态下卵巢局部miRNA表达谱变化进行了探索，在卵巢组织局部能够检测出miRNA共517个，其中PCOS较对照组表达上调的microRNA共89个，表达下调共4个。采用生物信息学方法对差异miRNA情况进行分析，获得这些miRNA功能及其调控机制的网络。我们筛选和验证了miR-92a在伴有高胰岛素血症PCOS患者的卵巢组织中表达下调，采用QPCR、Western blot、荧光素酶报告系统等实验方法证实miR-92a通过调控雄激素合成关键酶CYP17的重要转录因子GATA6的表达，进而参与调控雄激素的合成。该课题的完成为阐明PCOS高胰岛素血症调控高雄激素血症内在作用关键因子，阻断其病理进程提供了新线索；为临床治疗提供新思路，为发展新型基因治疗药物奠定基础。