舒血宁注射液致敏组份的筛选及其诱导过敏样反应的分子机制研究

As a drug to treat cardiovascular and cerebrovascular related diseases, Shu Xue Ning Injection (SXNI) induces adverse reactions in clinical use, and the hypersensitivity reactions are more serious. However, the allergen components of SXNI, and the mechanism underlying the hypersensitivity reactions is unclear. Vascular hyperpermeability or infiltration is one of the main pathological features of hypersensitivity reactions caused by Traditional Chinese Medicine Injection. We found that SXNI induced vascular permeability, increased the expression of VEGF in the mice ear tissues. In addition, the mechanistic target of rapamycin (mTOR) regulates VEGF through hypoxia inducible factor 1α (HIF1α). Nevertheless, the function of mTOR-HIF1α-VEGF signaling pathway in SXNI caused hypersensitivity reactions is unknown. We will active or inhibit mTOR-HIF1α-VEGF signaling pathway in the vascular hyperpermeability mouse model and human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) to explore the mechanism of hypersensitivity reactions due to SXNI administration. Our work may provide a better preventing and therapeutic strategy for the hypersensitivity reactions caused by SXNI, and a better suggestion for SXNI production.

舒血宁注射液常用于治疗心脑血管相关疾病，其在临床使用中存在不良反应，其中以过敏样反应较为严重。舒血宁注射液组份复杂，其诱发过敏样反应的组份和分子机制不详。血管通透性增高或血管渗出是中药注射液引起过敏反应的主要病理特征之一。我们发现舒血宁注射液诱导小鼠血管通透性增高，上调耳组织血管内皮生长因子(VEGF)表达；已知雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通过缺氧诱导因子1α (HIF1α) 上调VEGF。而mTOR-HIF1α-VEGF通路是否参与舒血宁注射液致敏组份导致的过敏样反应尚无报道。本项目拟在前期工作基础上，采用小鼠血管通透性增高模型筛选舒血宁注射液致敏组份，同时结合体外血管内皮细胞transwell chamber培养模型，通过正向激活、反向抑制两个方向阐明mTOR-HIF1α-VEGF通路在舒血宁注射液致敏组份诱导的过敏样反应中的作用，为其临床过敏样反应的防治和治疗以及药物生产提供理论依据。

舒血宁注射液常用于治疗心脑血管相关疾病，其在临床使用中存在不良反应，其中以过敏样反应较为严重。舒血宁注射液组份复杂，其诱发过敏样反应的组份和分子机制不详。血管通透性增高或血管渗出是中药注射液引起过敏样反应的主要病理特征之一。舒血宁注射液诱导小鼠血管通透性增高，激活mTOR信号通路，促进血清中VEGF分泌增高。在HUVEC细胞中通过敲低TSC1基因激活mTOR信号通路，结果发现mTOR信号通路诱导细胞单层通透性增高，细胞骨架增粗。舒血宁注射液在HUVEC细胞中激活mTOR信号通路，促进单层细胞通透性增高，细胞骨架增粗。而雷帕霉素可以降低舒血宁注射液诱导的单层细胞通透性增高和细胞骨架增粗。雷帕霉素预处理小鼠后，可以降低舒血宁注射液诱导的小鼠过敏样反应。因此我们可以得出结论：舒血宁注射液通过mTOR信号通路诱导小鼠过敏样反应。舒血宁注射液是银杏叶提取物制成的中药制剂，主要成分是银杏黄酮类化合物和银杏内酯，黄酮类化合物主要包括异鼠李糖3-O-芸香糖苷、槲皮素3-O-芸香糖苷、山奈酚3-O-芸香糖苷；银杏内酯主要包括银杏内酯A，B，C，J。我们进一步使用高内涵检测技术建立细胞模型筛选舒血宁注射液致敏组份，结果发现异鼠李素-3-O-芸香糖苷可能是舒血宁注射液的致敏组份。本课题筛选了舒血宁注射液的致敏组份，阐明舒血宁注射液引起过敏样反应的分子机理，为临床预防和治疗舒血宁注射液诱导的过敏样反应提供理论基础，同时为药品生产厂家提供质量标准参考。