应用新型乙肝模型-中国旱獭模型研究乙肝病毒感染早期TLR介导的天然免疫

乙型肝炎是危害人民身体健康和社会经济发展的重大公共卫生问题。来自WHV感染土拨鼠模型和HBV感染病人的资料提示HBV感染早期天然免疫细胞如APC、NK和NKT细胞即被活化并产生有效的抗病毒应答，对"HBV是Stealth病毒"的早期观点提出了质疑，因此很有必要对HBV感染早期的天然免疫应答进行深入研究。TLR是天然免疫活化的核心，体外研究发现HBV感染能很快活化TLR信号通路并产生有效的抗病毒应答，但关于HBV感染早期TLR信号通路应答的体内研究还有待进一步完善。本研究拟应用在HBV感染早期免疫应答研究中具有独特优势的WHV感染旱獭/土拨鼠模型，通过分析急慢性WHV感染、TLR信号通路及T细胞免疫应答之间的关系，以及观察用TLR配体活化或用药物抑制TLR信号通路对病毒感染结局及T细胞免疫应答的影响，阐明HBV感染早期TLR信号通路在HBV感染的清除或慢性化及诱导特异性免疫应答中作用。

应用土拨鼠成纤维细胞系W12/6细胞和PBMC对土拨鼠TLR信号通路进行了初步分析，结果发现正常土拨鼠PBMC对TLR配体（P3C、poly(I:C)、LPS）刺激产生明显应答，但土拨鼠成纤维细胞系W12/6细胞仅对LPS刺激产生应答。对WHV感染早期TLR介导的天然免疫应答进行了初步分析，结果发现WHV感染早期土拨鼠PBMC中TLR相关分子表达明显上调，且对TLR配体刺激产生明显应答。最近的研究结果显示MDA-5和RIG-1可能参与识别HBV感染，根据最近的研究结果我们及时调整了研究计划，获得了识别病毒RNA和胞内DNA的土拨鼠模式识别受体RIG-1、MDA-5、AIM-2、IFI16及其相关分子LGP-2、RelA、ISG15序列。应用RNA-SEQ技术对WHV感染早期天然免疫应答状况进行了初步分析，发现WHV感染早期土拨鼠肝脏TLR、NOD信号通路分子的表达出现明显变化。上述研究结果为进一步探讨HBV感染早期的天然免疫应答提供了重要的实验依据。