高效毛细管电泳检测限制性内切酶酶切产物方法学研究

许多癌组织的基因组DNA存在点突变、缺失或易位，检测DNA基因突变点在肿瘤基因治疗和基因疾病诊断中有着重要的临床意义。随着毛细管电泳（CE）技术在分子生物学中的应用，对常规和常量的突变基因的检测较广泛地采用琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺电泳技术有极大的优越性。目前对DNA突变点的研究仅限于实验室研究，但是真正能够用于临床诊断和疾病预测方面的还相对有限，且目前诊断方法多是基于肿瘤已形成，或肿瘤处于中期或晚期。本课题设计合成毛细管柱修饰的聚合物和选择聚环氧乙烷等聚合物中添加的胶粒修饰石英毛细管柱，建立毛细管电泳-激光诱导荧光检测方法（CE-LIF）对不同的限制性内切酶酶切不同长度DNA片段的产物进行检测，系统地考察所修饰毛细管柱性能、毛细管柱修饰技术和建立分离不同长度DNA片段酶切产物方法的科学性、可靠性和规律性，为进一步检测正常人及患者体内基因变异的差异提供理论依据。