VEGF-PEA融合基因构建和靶向表达特异抑制肿瘤新血管

用PCR法从克隆了DT390、VEGF165、VEGFexon7基因片段。构建了携带DT390-VEGF65、DT390-VEGFexon7的真核表达载体、四环素tet-off系统调控的融合基因真核表达载体以及重组腺病毒载体。实验结果表：融合基因可以在肿瘤细胞中表达，具有溶解细胞的细胞毒活性：融合基因表达产物可以使鸡胚绒毛尿囊膜血管网产生血管损伤。免疫荧光抗体染色法检测到携带融合基因的裸露质粒直接注射荷胃癌裸鼠,可以被瘤体吸收并得到表达,但无明显的治疗效果；四环素系统开关不严密，目的基因具有一定的漏表达，但不影响重组腺病毒的包装。重组腺病毒感染的肿瘤细胞具有旁杀伤效应，用其治疗荷肝癌裸鼠的初步结果表明,其可以使AFP值下降。本研究为进一步纯化用于动物实验奠定了基础。