FGFR1基因靶向“多功效”融合蛋白抗肿瘤血管生成研究

靶向和抗血管治疗是肿瘤治疗研究的两大热点。FGFR1特异表达于肿瘤新生血管的内皮细胞表面，是抗肿瘤血管生成的重要靶点。申请者前期研究表明，以FGFR1为靶点的免疫治疗具有抑制肿瘤新生血管生成的作用，并获得了分泌抗FGFR1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。在此基础上，本研究拟通过RT-PCR获得抗FGFR1抗体的重链和轻链可变区的基因DNA片断，再通过RT-PCR获得癌促凝物质（CP）基因cDNA。利用基因工程技术，构建此单链抗体（ScFv）和CP的原核表达载体，在大肠杆菌中表达出重组的抗FGFR1单链抗体-癌促凝物质的融合蛋白，经提纯复性后测定活性并在小鼠肿瘤模型进行试验，观察是否能够靶向阻塞肿瘤新生血管，是否具有抑制肿瘤血管生成的作用，从而达到治疗肿瘤的目的，并初步探讨其作用机制，从而为肿瘤的生物治疗提供新的策略。

本项目将基因工程技术获得的具有CP酶活性又可特异性靶向结合于肿瘤血管的“多功能”重组蛋白在几个小鼠肿瘤模型中进行试验。研究发现，FGFR1单链抗体能够特异性靶向结合于肿瘤新生血管内皮细胞表面，使具有酶活性的癌促凝物质在肿瘤新生血管中富集并诱发血栓形成，从而阻塞肿瘤血管导致肿瘤细胞坏死，进而达到治疗肿瘤的目的。同时也发现FGFR1单链抗体较之单克隆抗体具有更强的肿瘤组织穿透力和靶向性。此外，构建了小鼠FGFR1基因的真核表达质粒，并增加了FGFR1相关的肿瘤发生与干预机制研究。阶段性研究成果将为后续FGFR1靶标相关研究积累经验，并为肿瘤生物靶向治疗提供了新的策略，具有一定的应用前景。