基于整体观的中药复方(糖肾方)"系统-系统"的现代基础研究

针对中医药研究中存在方-证-病割裂、基因-蛋白质-代谢物研究分离的现状，本研究以糖肾方的基础研究为范例，应用"系统-系统"的研究模式探讨"药物系统"（复方药物）和"生物系统"（生病的人）之间的相互作用，综合运用化学物质组学、血清药物化学、网络药理学和系统生物学等研究技术，通过"方病对应"、"证病结合"和"方-证-病整合"三个层次研究的策略，揭示化学物质组（中药复方）的变化与生物系统（临床患者与实验动物）应答的时空响应的相关性，系统阐述糖肾方益气、养阴、活血功效对应的物质基础及配伍关系，系统阐明君药益气之功、臣药养阴之效、三佐药活血化瘀之益，五药协同、整合调控的系统网络调控机制。

针对中医药现代化研究中存在的“方-病-证割裂”和“基因-蛋白质-代谢物分离”的两大问题，本研究提出了建立“系统-系统”模式的关键科学问题和实现“方-病-证整合”研究途径的解决之道，给出了研究路线总体设计的框架。在“系统-系统”的研究模式下，通过了“方-病关联研究”、“病-证结合研究”和“方-病-证整合研究”三阶段的研究，开展了基于“整体观”的糖肾方现代基础研究。（1）“方-证关联”研究：建立了糖肾方指纹图谱；采用多种质谱组合分析策略鉴定了糖肾方中59个化合物的结构，对糖肾方中59个化学成分进行靶点预测和验证，糖肾方可能通过对PPAR、MAPK、Endocytosis、Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) 和Pathways in cancer (hsa-5200) 和Colorectal cancer等通路的调节治疗DN；采用自发性糖尿病肾病db/db模型和高脂饲料合并脲佐菌素诱导的气阴两虚证夹瘀证2型DN大鼠模型，从经典药理学角度证实糖肾方对糖尿病肾病模型大鼠的治疗作用；糖肾方通过对脂类代谢、嘌呤嘧啶代谢等代谢途径的调节改善DN发展；竞争抑制 JAK/STAT 炎症信号通路和炎症介质的生成可起到抑制炎症反应的作用，是糖肾方延缓肾脏纤维化的重要途径之一；糖肾方干预2型糖尿病胰岛素抵抗的作用与其对PI3K/AKT/SREBP-1c通路重要基因表达的调节作用有关。(2) “病-证结合研究”，通过对DN横断面临床样本临床理化指标，中医证候、症状，基因-蛋白-代谢标志物进行聚焦，创建了DN整合生物标志物体系，包括4个临床生化指标和12个代谢标志物的综合指标体系，该体系可区分其亚型和病理进程，发现了糖尿病肾病分期与早期诊断的生物标志物群。（3）“方-病-证整合”研究：开展了糖肾方治疗DN的多中心、随机、双盲、安慰剂对照临床试验，糖肾方降低24h尿蛋白定量，升高eGFR，改善了中医证候积分，糖肾方是治疗DN的有效方剂；临床系统生物学研究表明，糖肾方调控机体的免疫功能、炎症反应、代谢紊乱及细胞凋亡等功能，发挥其治疗DN的作用，并明确糖肾方药效物质基础。