反义核酸和核酶技术用于心血管疾病治疗的实验研究

建立了血管紧张素转换酶(ACE)活性测定的FAPGG法和定量PCR法，分离培养了大鼠血管内皮细胞并筛选反义寡核苷酸的抑制条件。克隆到一个新基因片段(ECRG)U并检测其分布。大鼠肺血管内皮细胞传四代后细胞增殖趋于稳定，纯度达到95%以上，ACE活性及mRNA表达也处于稳定期。用正交设计发现10uM的反义寡核苷酸抑制24小时可以得到最好的ACE抑制效果。反义组ACEmRNA表达水平显著低于正义组和随机组（方差分析，F=18.86 P=0.007)。多重比较提示正义组和随机组的ACEmRNA表达水平无明显差异。用差异显示技术克隆到的未知片段命名为ECRG(内皮细胞相关基因)，测序发现序列部分和端粒酶同源。用多组织杂交技术发现该基因除了在内皮细胞高表达外还在肺高表达，值得进一步研究。