内源性大麻素对尾核神经元损害的保护作用和分子机制的研究

尾核(caudate nucleus, Nc)是基底神经节的重要组成成分，在信息会聚、运动调节等生理功能和缺血性脑损伤、运动障碍等临床病变中具有重要作用。Nc是参与痛觉调制的高级中枢之一，内源性大麻素(eCBs)受体在Nc内有丰富的表达，eCBs在镇痛中发挥着重要的作用。但eCBs对促炎因子脂多糖(LPS)和兴奋毒损伤刺激物海人酸(Kainic Acid, KA) 引起尾核神经元损害的保护作用及其机制的研究尚无报道。本项目拟在分离的尾核和新生大鼠原代培养的尾核神经元应用免疫印迹法（western blot）、实时定量RT-PCR、细胞毒效应测定及电生理全细胞膜片钳等方法研究eCBs对LPS和KA引起的尾核神经元损害的保护作用及其分子机制，有助于理解神经退行性疾病和病理性疼痛的机制，为减轻或阻止由于环氧合酶-2的过度表达导致的神经退行性疾病和病理性疼痛，探索新的治疗方法和途径，提供理论依据。

本研究项目“内源性大麻素(eCBs)对尾核神经元损害的保护作用和分子机制的研究”以eCBs对尾核神经元的损害具有保护作用作为假设，探讨其细胞和分子机制。围绕以下内容展开研究：（1）2-AG对LPS或KA诱导尾核神经元COX-2表达的影响，CB1受体是否介导这一作用；（2）2-AG介导LPS诱导的COX-2表达调节的信号途径；（3）2-AG 对促炎因子和细胞兴奋毒刺激所致的神经元损害的效应；（4）全细胞膜片钳研究2-AG对LPS所诱导的诱导尾核神经元mEPSC变化的影响及对Na、K离子通道特性的影响。通过对实验结果的分析，得出以下结论：（1）2-AG对LPS或KA诱导的COX-2表达增加起抑制作用，该抑制效应可能是通过CB1受体起作用的；（2）ERK，MAPK, NF-κB等信号途径可能参与2-AG抑制COX-2表达增加的调节；（3）2-AG抑制LPS诱导的mEPSC频率的增加，2-AG可调制LPS诱发的Na通道特性的改变。（4）2-AG 对促炎和细胞兴奋毒刺激所致的神经元具有保护作用。本研究结果对于揭示eCBs对神经元损害的保护作用和COX-2相关的神经变性病的作用机制具有重要意义。