Notch信号通过LEF-1调节结肠癌发生发展机制研究

既往研究表明结肠癌中Notch信号途径被过度激活,可能是结肠癌诱发因素之一。而LEF-1作为Wnt信号途径重要组成分子，在结肠癌及结肠癌细胞系中也表现为全长型蛋白异常高表达。我们前期研究发现，LEF-1表达模式对结肠癌细胞系生物学行为具有明显调控作用，而Notch途径亦可在多种细胞系中调节LEF-1不同亚型启动子活性，提示两者在结肠癌中可能存在相互作用，但具体机制并不清楚。本课题拟在此基础上，利用Notch剔除小鼠和AOM诱导的小鼠结肠肿瘤模型，全面分析Notch途径相关分子与LEF-1在结肠癌中表达的相关性，探讨Notch途径对LEF-1表达的调节机制,明确参与调节的下游分子。通过Notch途径对结肠癌细胞系生物学行为影响的检测，试证实Notch信号通过LEF-1与Wnt信号发生交互作用，共同参与结肠癌的发生发展过程，为深入理解结肠癌的发病机制，探寻结肠癌治疗的新靶点提供一定的理论依据。

在成功构建AOM诱导的小鼠结肠肿瘤模型的基础上，研究Notch途径相关分子与LEF1在结肠癌中表达的相关性，发现Notch1、Jagged1和LEF1在AOM诱导的小鼠结肠癌中的表达明显高于结肠正常组织；而在人结直肠癌组织和对照正常组织中，LEF1、β-catenin和Notch信号通路相关配体Jagged1在结直肠癌中高表达， Notch2受体在结直肠癌中低表达，四者与患者临床病理因素密切相关；Notch通路抑制剂DAPT可以抑制SW480细胞的生长、增殖速度，DAPT抑制SW480的增殖主要通过诱导细胞凋亡而并非调控细胞周期来实现的，DAPT抑制Notch活性后可以影响LEF1的表达；Dll1刺激SW480细胞24小时后， Notch 通路被激活，LEF1 分子也随之上调，随后的报告基因实验也可以证明激活Notch 通路可以上调LEF1的表达,但是激活Notch 通路对SW480 的周期和凋亡无明显影响; LEF1下调可以显著抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，LEF1也可能通过RBP-jκ发挥对Notch信号通路的调节作用。Notch信号通路通过LEF1调节结肠癌的发生发展。