芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体损伤后肺修复机制研究

Children mycoplasmal pneumonia belong to xeropulmonary cough of Traditional Chinese Medicine and is treated by heat clearing-detoxication, moisten the lung and relieve cough. Qinbaiqingfei pellet that is studied and developed by applicant is a far superior medicine on treating mycoplasmal pneumonia, whose integrated curative effect is better than Azithromycin and the rate of recovery and obvious effect is 6.3% higher. Earlier study show that Qinbaiqingfei pellet can not only kill mycoplasmal pneumonia but also protect lung epithelial cells. On the basis of cells and animals model built my group, we try to research Qinbaiqingfei pellet regulate EGF Cell signaling mechanisms on lung epithelial cells after Mycoplasma Pneumoniae Infection by Real-timePCR、WesternBlot and COIP. It is bound to be of great service on a raising of therapeutic effect and deep development.

儿童支原体肺炎属中医学外感风热燥毒所致"肺燥咳嗽"，以清热解毒、润肺止咳为主要治则。以此治则，课题申请者研发了国家新药芩百清肺浓缩丸，是治疗支原体肺炎具有优势的药物，总疗效优于阿奇霉素颗粒，愈显率高6.3%，该药在杀灭肺炎支原体之外具有保护肺上皮细胞的作用。本项目以芩百清肺浓缩丸为研究对象，以其对肺炎支原体感染后肺上皮细胞的损伤修复为出发点，旨在研究小儿感染肺炎支原体后肺结构破坏的修复,以填补目前临床西药的不足。在本课题组建立的细胞和动物模型基础上，利用分子生物学研究方法，探明芩百清肺浓缩丸在细胞分裂间期和分裂期对EGF 介导的信号通路中重要蛋白磷酸化水平变化及对周期调控蛋白研究，从分子水平上直接阐明细胞因子及信号通路分子调控机制，研究关键基因的调控网络，解析芩百清肺浓缩丸作用靶点。本研究首次从肺上皮细胞损伤修复角度揭示中药抗肺炎支原体作用机制，为该新药疗效提高和深度开发提供理论和实验根据

儿童支原体肺炎属中医学外感风热燥毒所致“肺燥咳嗽”，以清热解毒、润肺止咳为主要治则。以此治则，课题申请者研发了新药芩百清肺浓缩丸，是治疗支原体肺炎具有优势的药物，该药在杀灭肺炎支原体之外具有保护肺上皮细胞的作用。本项目以芩百清肺浓缩丸为研究对象，以其对肺炎支原体感染后肺上皮细胞的损伤修复为出发点，旨在研究小儿感染肺炎支原体后肺结构破坏的修复,以填补目前临床西药的不足。本课题组首先使用肺炎支原体检测试剂盒检测肺炎支原体菌株纯度，使用CCU检测肺炎支原体浓度，MTT法检测肺炎支原体感染后细胞活力。使用Realtime PCR和肺炎支原体荧光显色试剂盒检测肺炎支原体感染细胞和小鼠情况，成功建立细胞和动物感染模型。在此基础上，芩百及其单体的毒性试验、药效试验和MIC实验被完成。肺炎支原体感染细胞，给予芩百及其单体后，使用细胞计数、MTT、划痕实验、克隆实验和HE染色检测A549细胞增殖情况。利用Realtime PCR、免疫组化和流式细胞技术等研究方法，探明芩百清肺浓缩丸对肺炎支原体感染后肺细胞因子PCNA、MEK、p-MEK、ERK、c-Jun、JAK、STAT3、Wnt5a、TGF、P1和P30等表达的影响。在细胞分裂期对PCNA、MEK、ERK、c-Jun等信号因子表达的影响，结果表明肺炎支原体肺炎小鼠使用芩百治疗后，PCNA、MEK、p-MEK、ERK、c-Jun、JAK、STAT3蛋白表达增强，Wnt5a、TGF、P1和P30表达下降。本研究首次从肺上皮细胞损伤修复角度揭示中药抗肺炎支原体作用机制，为该新药疗效提高和深度开发提供理论和实验根据。