ESCRT体系中Vps60肽段（128-186aa）与Vta1蛋白N-端结构域复合物溶液结构确定

多囊泡体（MVB）途径在许多真核细胞过程中发挥重要作用。该功能的正确发挥，需要ESCRT复合物可逆的附着在细胞膜上，而后者被ATP酶Vps4催化。蛋白Vta1能调节Vps4活性。Vta1晶体结构研究表明，其N端结构域(简写为Vta1NTD)包含两个功能未知的串联MIT结构域，它们与Vps4蛋白MIT结构域结构同源性较高，介导Vta1蛋白与ESCRT-III蛋白Vps60和Did2的相互作用。但基于同Vps4结构同源性推知的Vta1蛋白MIT结构域中一些重要氨基酸对Vta1蛋白与其配体结合活性并不重要，这表明Vta1的MIT结构域与其配体的结合模式，是一种新的不同于Vps4的模式。研究还发现Vta1NTD主要与Vps60蛋白肽段128-186aa相互作用。为了深刻理解新的MIT结构域识别其配体模式，本项目拟应用分子生物学与核磁共振波谱学方法确定Vta1NTD/Vps60肽段复合物溶液结构。

ATP水解酶Vps4对多囊包体(MVB)途径非常重要，该功能能够影响细胞一些生理功能，包括下调、发泡、细胞凋亡等。Vps4活性受Vta1与Vps60相互作用而激活，但相关的结构基础不清楚。文献报导， Vps60 (128-186)能够显示全长Vps60的活性，而Vta1利用其N-端（即：Vt1NTD)与Vps60相互作用。本项目旨在利用NMR等技术确定Vta1NTD与Vps60(128-186)复合物三维结构。我们最终的结构显示，Vps60一种新型的MIT结构域识别模式与Vta1NTD相互作用。在该识别模式中，Vps60(128-186)通过其螺旋4'与5'与Vta1NTD的螺旋1，2和3相互作用。而且，复合物的三维结构显示，Vps60的结合并没有导致Vta1NTD的构象变化，该研究结果表明Vps4作为ATP水解酶，其活性被Vta1NTD及Vps60相互作用增强，相关机制可能不是当前研究所能预测的。