自吞噬相关蛋白LC3Av1在牙髓炎症中的作用机制研究

The pulpitis is a complex process of inflammation and immune pathology mainly caused by anaerobic. As reported，autophagy plays an important role in inflammation and infectious diseases as defense and metabolic function. There is no report about the function of autophagy in pulpitis. The applicant found that LC3Av1 involved in autophagy as well as LC3B, and can be used as a marker for autophagy activity. In this study, we plan to examine the expression level of LC3Av1 in normal pulp cells. And depending on the expression level, we will culture LC3Av1 stable overexpression or knockout pulp cells. Next, we approach to detect the autophagy function during starvation induced autophagy when wild type and stable overexpression or knockout pulp cells were treated by LPS which is a pulpitis inducer. Furthermore, we will examine the expression level of LC3Av1 in in vivo pulpitis samples. Based on this study, we finally aim to find autophagy promote or inhibit the inflammation progress of pulpitis and provide new basis for pathogen clearance mechanism of pulpitis.

牙髓的炎症主要是以厌氧菌为主的混合菌群感染所致。国内外报道显示细胞自吞噬作为机体内一种重要的防御及代谢功能，在炎症及感染性疾病中发挥着重要的作用，但是其在牙髓炎症中的作用机制尚未见报道。申请者最新研究发现微管相关蛋白LC3Av1同LC3B一样，参与细胞自吞噬作用的整个过程，并可作为细胞自吞噬过程发生的标记物用于活性检测。本研究拟根据正常牙髓细胞中LC3Av1的表达水平，培养出LC3Av1的表达缺陷或过度稳定表达的牙髓细胞，通过牙髓炎主要致病毒素LPS对细胞进行致炎反应，同时营养饥饿手段诱导自吞噬发生，进而分析发生炎症时LC3Av1在牙髓组织自吞噬活动中发挥的作用。并进一步以LC3Av1为目的蛋白，比较分析动物模型正常牙髓和牙髓炎标本的自吞噬活动水平，以期一定程度上分析自吞噬在牙髓炎病原体感染中起到促进还是抑制作用，为牙髓炎病原体清除机制提供新的科研依据。

牙髓炎是临床常见病、多发病，主要是以厌氧菌为主的混合菌群感染所致。国内外报道显示细胞自吞噬作为机体内一种重要的防御及代谢功能，在炎症及感染性疾病中发挥着重要的作用，但是其在牙髓炎症中的作用机制尚未见报道。我们以前的研究发现微管相关蛋白LC3Av1同LC3B一样，参与细胞自吞噬作用的整个过程，并可作为细胞自吞噬过程发生的标记物用于活性检测。本研究通过牙髓炎主要致病毒素LPS对细胞进行致炎反应，检测LC3Av1的表达变化，进而分析发生炎症时LC3Av1在牙髓组织自吞噬活动中发挥的作用。并进一步以LC3Av1为目的蛋白，比较分析动物模型正常牙髓和牙髓炎标本的自吞噬活动水平，以期一定程度上分析自吞噬在牙髓炎病原体感染中起到促进还是抑制作用，为牙髓炎病原体清除机制提供新的科研依据。本实验研究发现无论是在LPS诱导的牙髓细胞炎性反应和实验性牙髓炎动物模型中，LC3Av1的表达均随着炎症的进展有所增加，提示其表达及尤其介导的自噬在牙髓炎的发生发展中发挥作用，但其作用机制仍在探讨中。