基于超分子自组装的白芨胶纳米微粒作为难溶性药物载体的应用

白芨胶为从中药白芨中提取的天然多糖物质，作为药物载体在肝癌栓塞等领域具有应用前景，但天然白芨 胶水溶性过强，其骨架易于溶蚀，控释作用较差，并且白芨胶分子结构中缺少疏水区域，不易于包载难溶 性药物。针对上述问题，本项目拟通过胆甾醇琥珀酰基修饰白芨胶，使之疏水性加强，形成两亲性分子， 通过超分子自组装形成纳米粒。对化学修饰的白芨胶生物大分子进行表征；以紫杉醇为模型药物，通过超 滤法制备白芨胶纳米粒，并对其进行表征；体外考察纳米粒与细胞的相互作用，体内研究白芨胶纳米粒的抗肿瘤活性、药动学及组织分布。本项目将提供一种新型改性天然水凝胶高分子材料，并拓展其在药物递送领域的应用（包括包封抗癌药物；缓释；靶向给药和发挥白芨胶自身抗癌作用）。本项目的研 究将为发掘中药和天然资源提供新的参考思路。

白芨胶是一种新型的天然高分子材料，作为药物载体在药物递药领域具有良好的应用前景，但其亲水性强，水中溶蚀太快，不宜用作缓释骨架材料，并且包载脂溶性药物存在困难。因此，我们采用适当的化学手段对白芨胶改性，以提高白芨胶水凝胶的强度，提高其包载药物的能力，拓展其应用范围。主要研究内容及结果有：①白芨多糖的提取及其表征；②胆甾醇基化白芨胶的合成、表征以及性质研究；采用紫外-可见分光光度计测定取代度能达到4.78、3.82。采用核磁共振H谱法测定，根据峰面积比值计算结果如下：5.22、4.26。③载药紫杉醇的白芨胶纳米粒制备和表征；采用透析法制备自组装载药纳米粒，表征：1）包封率和取代度的测定，采用高效液相色谱法测定取代度分别为6.55%、7.3%、8.91% 的CHSB自组装载药纳米粒，载药量分别为12.99%、17.72%、14.07%，药物包封率分别为59.25%、72.06%、53.47%。2）CHSB自组装载药纳米粒的体外释放，采用高效液相法测定药物的体外释放，测得不同时间点（0.5、1、2、4、6、8、12、24、36、48、72、96h）的药物释放量，取代度为6.55%的样品在24h时累计释放达97%以上；取代度为7.3%的样品在48h时累计释放达94%以上；取代度为8.91%的样品在24h时累计释放达93%以上；④载紫杉醇的白芨胶纳米粒体、内外抗肿瘤活性；体外试验进行了细胞毒性试验、细胞摄取试验，结果显示了所选用载体材料具有较好的生物安全性，所制备的纳米粒对肿瘤细胞有一定的杀伤能力，且与同浓度的药物溶液相比，杀伤性更大，间接表明载药纳米粒子更容易被细胞摄取。表明CHSB作为药物载体具有较高的可行性，它不仅对模型药物紫杉醇起到了增溶的作用，更使得药物更容易进入到细胞内。体内试验采用H22荷瘤小鼠抑瘤率和胸腺指数、脾指数和肝指数的测定来考察药效。表明载紫杉醇纳米粒与紫杉醇注射液比较，有明显的抗肿瘤活性（p<0.05）。⑤载紫杉醇的白芨胶纳米粒的药动学研究。以紫杉醇注射液和自制紫杉醇混悬液为参比制剂考察了大鼠尾静脉注射载紫杉醇的白芨胶纳米粒后和灌胃给予载紫杉醇的白芨胶纳米粒后的体内药动学，注射给予紫杉醇注射液和紫杉醇纳米粒的t1/2分别是（2.62±0.65）、（3.83±0.36）min，AUC分别是（37.425±3.42）（25.31±1.56）mg/L*h，口