胸膜肺炎放线杆菌脂蛋白Lip40致病机理的研究

胸膜肺炎放线杆菌（APP）是引起猪传染性胸膜肺炎（PCP）的病原菌，严重危害养猪业的健康发展。通过基因芯片和荧光定量RT-PCR分析发现，APP JL03株假想脂蛋白APJL_1178（Lip40）在模拟感染条件下表达上调，lip40基因缺失突变株（Δlip40）对小鼠致病力下降。因此，本项目拟进一步研究JL03株Lip40的致病机理，主要内容为：获得重组蛋白rLip40，鉴定其免疫原性，制备兔抗rLip40多克隆抗体；构建互补菌株CΔlip40，比较Δlip40、CΔlip40和JL03的生物学特性，特别是致病性的差异；分析rLip40与猪肺巨噬细胞相互作用，通过ligand overlay和pull down技术寻找Lip40的细胞受体。通过上述研究，明确Lip40的致病性及机制，为进一步研究APP脂蛋白功能和APP致病机理奠定基础，也为制备安全高效APP疫苗提供理论指导。

胸膜肺炎放线杆菌（APP）是一种多血清型、多致病因子的病原菌，可导致猪胸膜肺炎，其感染机制复杂，现有研究尚不能诠释及感染机制。目前，人们对APP脂蛋白功能了解较少，因此，本研究以APP脂蛋白Lip40为靶蛋白，对其生物学特性及致病性及致病机制进行了较为全面的研究。结果表明，Lip40是一种多应激诱导型外膜脂蛋白，具有良好的免疫原性；APP Lip40缺失突变株对小鼠致病力减弱，且在小鼠体内定植能力下降；仔猪感染实验从临床症状、血糖水平、剖检病变和病理切片等方面进行详细观察和评价，野生型SLW01及回复突变株CΔlip40感染相关指标均显著高于突变株Δlip40，表明Lip40缺失后APP致病性显著下降，血糖变化提示Lip40缺失株造成仔猪菌血症的能力减弱。本项目研究结果为进一步深入研究APP脂蛋白功能和阐述APP致病机制提供了数据支持和保障。