食品检验中糖类"标识组合型"指纹色谱质控技术的构建

糖类作为细胞的基本结构成分和初级代谢产物广泛存在于农作物中，且农作物的次生代谢产物也多以糖苷的形式存在，糖类因而成为农产品中普遍存在的功效成分或残留杂质。为此，发展食品的糖类高效质控技术具有重要意义。本研究拟采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮（PMP）作为还原醛糖的标记分子，提高传统C18色谱柱对系列PMP标记醛糖的分离识别能力，发展"醛糖标识型"高效液相色谱-紫外（HPLC-UV）分离鉴别技术；同时，在此PMP标记醛糖的高效分离模式基础上，结合蒸发发光散射检测（ELSD）方法，构建大批量还原醛糖和非还原酮糖有机组合的"标识组合型"糖类 HPLC-ELSD指纹鉴别技术，对可能存在于食品中的常见单、寡糖实现高效分离和准确鉴别；并以系列果汁、酒类、益生元食品为主要应用评价体系，首次将该糖类色谱鉴别技术用于食品指纹图谱的构建，克服食品质控中对照品缺乏的问题，为农产品质控技术的发展提供新思路。

糖类作为细胞的基本结构成分和初级代谢产物广泛存在于农作物中，且农作物的次生代谢产物也多以糖苷的形式存在，糖类因而成为农产品中普遍存在的功效成分或残留杂质。为此，发展食品的糖类高效质控技术具有重要意义。. 本项目利用实验室常规配置的高效液相色谱-紫外检测器（HPLC-UV）和普通C18色谱柱，采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮（PMP）作为还原醛糖的标记分子，发展了系列常见还原单寡糖（14种: 氨基葡萄糖、甘露糖、核糖、鼠李糖、半乳糖胺、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、麦芽糖、葡萄糖、乳糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖、岩藻糖）的“醛糖标识型”HPLC-UV分离鉴别质控技术，研究了它们的分离机制与色谱学行为。. 本项目也同时构建了10种常见还原单糖的HPLC-UV快速分离鉴别模式，通过调节梯度洗脱模式，10种常见还原单糖可分别在27 min、25 min、18 min和13.5 min内得到良好的基线分离。结果表明，醛糖的PMP标记与流动相TEA配比分离调节相结合，可大幅度调节此系列PMP标记糖的分离度，具有很高的分离控制性。将此HPLC-UV质控技术与我们建立的食物中可能存在的5种非还原酮糖（果糖、山梨糖、蔗糖、棉子糖、水苏糖）的HPLC-ELSD鉴别技术相结合，分别检测糖样品的PMP标记醛糖（低极性）及未衍生化的酮糖（高极性），可进行大批量食品中可能存在的功能成分或残留杂质糖类（约19 种）的质量控制。. 本项目采用PMP标记醛糖，利用高效毛细管电泳-紫外检测器（HPCE-UV），在硼酸缓冲液浓度175mM，pH11.0，温度25℃，电压15kV，有机添加剂甲醇浓度4%的基本条件下，实现了13 种常见还原糖的有效分离，并研究了它们的色谱学行为，建立了食物中这些常见单寡糖的HPCE-UV分析鉴别技术。并成功地用于多种多糖的单糖组成分析和蜂蜜、牛奶与啤酒等食物中还原单寡糖的测定，从而为这些食物糖类的质控提供有效的指标。. 本项目构建的对可能存在于食品中的常见单寡糖的高效HPLC与HPCE分离鉴别及定量技术，可通过对普通食品中共性成分糖类的动态变化测定，用于普通食品的等级、新鲜度与货架寿命以及真伪的判定，提高食品的质控水平。相关研究结果已发表论文14篇，其中SCI 12篇。