胰岛内PTP1B对β细胞GSIS的调控作用及其机制研究

胰岛自身的胰岛素抵抗是联系外周胰岛素抵抗与β细胞功能缺陷的纽带，而蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP1B）是胰岛素信号通路重要负性调控因子。我们前期研究发现高脂饮食诱导肥胖大鼠胰岛内PTP1B表达增加，同时已开始出现葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS）功能受损。为了探明PTP1B对胰岛GSIS的调控作用，在建立PTP1B基因重组腺病毒和PTP1B靶向RNAi重组腺病毒的基础上，结合我们前期建立的用于评估胰岛素动态分泌功能的离体胰岛灌流系统，拟进一步研究PTP1B过表达或抑制表达对胰岛GSIS功能的影响，并通过检测胰岛β细胞胰岛素信号通路IR/IRS-1、PI-3K途径中相关激酶的表达和磷酸化水平，胰岛素分泌相关蛋白GCK、UCP2、PKC-δ、GLUT2的表达及转位情况，初步探讨PTP1B调控GSIS的作用靶点及可能机制。

胰岛自身的胰岛素抵抗是联系外周胰岛素抵抗与β细胞功能缺陷的纽带，而蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP1B）是胰岛素信号通路重要负性调控因子。本研究采用PTP1B基因重组腺病毒和PTP1B靶向RNAi重组腺病毒，通过体外及体内实验，分析PTP1B过表达或抑制表达对胰岛GSIS功能的影响及PTP1B调控GSIS的作用靶点及可能机制。结果表明：①高脂饮食诱导肥胖大鼠胰岛内PTP1B表达增加，同时出现GSIS功能受损。②PTP1B重组腺病毒转染大鼠原代胰岛细胞及胰岛β细胞系INS-1，胰岛细胞中PTP1B表达增加，GSIS功能受损。③PTP1B靶向RNAi重组腺病毒转染高脂饮食诱导肥胖大鼠的原代胰岛细胞，胰岛内PTP1B表达下降，灌流结果显示一相胰岛素分泌明显改善，同时IRS-1、IRS-2、PI-3K的表达及磷酸化水平增加，GLUT-2及GCK表达上调。因此，胰岛内PTP1B是葡萄糖刺激胰岛素分泌重要调控因子，为抑制PTP1B药物保护2型糖尿病胰岛功能提供科学依据。