去泛素化酶USP22基因突变对黑色素瘤T细胞杀伤耐受的免疫调控

Melanoma is a malignant skin disease which has caused great harm to the health of the people. Somatic gene mutations in melanoma play key roles in T-cell-based immunotherapies. At present, most studies focus on a certain signaling pathway to screen candidate genes which mediate in tumor immunotherapies and some critical genes may be ignored or unknown. Therefore, the systematic screening studies need to be carried out vigorously. Using CRISPR/Cas9 genome-wide knockout technique, we screened to get the candidate gene USP22 for resistance to T-cell-killing, and took the lead in confirming that USP22 mutations mediating in the regulation of T-cell-based immunotherapies in melanoma. By constructing the melanoma cell line with USP22 gene deficiency or overexpression, we aimed to explore mechanisms of USP22 gene mutations (deficiency or overexpression) mediating in the immunotherapies of melanoma.

黑色素瘤是危害我国国民健康的重要疾病，其自身的基因突变对黑色素瘤的治疗具有重要的免疫调控作用，但目前的研究多针对单一的信号通路进行测序或筛选，一些关键的基因极可能被忽视或遗漏，因此，系统性筛选对免疫治疗起关键作用的基因的工作亟需大力开展。利用CRISPR/Cas9全基因组敲除技术，我们筛选获得T细胞杀伤耐受的候选基因USP22，率先确认USP22基因异常参与黑色素瘤的免疫调控；并构建USP22缺失及过表达的黑色素瘤细胞系，探索USP22 基因突变（缺失或过表达）在黑色素瘤免疫治疗中的机制。

黑色素瘤是危害我国国民健康的重要疾病，其自身的基因突变对黑色素瘤的治疗具有重要的免疫调控作用，但目前的研究多针对单一的信号通路进行测序或筛选，一些关键的基因极可能被忽视或遗漏，因此，系统性筛选对免疫治疗起关键作用的基因的工作亟需大力开展。利用CRISPR/Cas9全基因组敲除技术，我们筛选获得T细胞杀伤耐受的候选基因USP22。本课题通过构建USP22缺失及过表达的黑色素瘤细胞系，进行体内及体外的功能验证，确认USP22是影响T细胞杀伤耐受的关键基因；RNA测序显示USP22与IFNg信号通路关系密切；进一步的分子机制研究发现，USP22基因依赖IFNg-JAK1-STAT1信号通路影响免疫杀伤耐受；此外，针对肿瘤微环境的研究发现，USP22基因异常通过影响肿瘤微环境中淋巴细胞浸润及NK细胞的活化影响肿瘤细胞的体内增长。通过对候选基因USP22的研究，我们发现其基因突变（缺失或过表达）的肿瘤免疫调控的作用及分子、细胞机制，回答了抗肿瘤免疫治疗耐受的部分机制，这将帮助我们理解临床黑色素瘤免疫学的机理，为其临床免疫治疗提供理论指导。