长链非编码RNA HOTAIR靶向调控PTEN抑制低氧性肺动脉高压的表观遗传机制

The long noncoding RNA HOTAIR is involved in the regulation of cell proliferation, migration and differentiation, but its role in hypoxic pulmonary hypertension(HPH) is not clear. Our preliminary study and research of other scholars found that the role of PTEN inhibiting HPH depended on methylation modification of PTEN, while HOTAIR could promote PTEN methylation of tumor cells, and the expression of HOTAIR of pulmonary artery smooth muscle cells induced by hypoxia was upregulated. Thus, we hypothesize that HOTAIR inhibits PTEN gene expression and induces HPH through epigenetic mechanisms. To further clarify the mechanism of HOTAIR in HPH, we will construct HOTAIR eukaryotic expression vector and siRNA interference vector. We will elaborate the effect of modulating HOTAIR expression on pulmonary artery smooth muscle cells proliferation, apoptosis and migration. Furthermore, we will clarify the role of HOTAIR on PTEN expression and the effect of HOTAIR on PTEN promoter methylation via chromatin immunoprecipitation technology. Finally, we will observe the role and mechanism of HOTAIR in the rat model of HPH. The results of the study will elucidate the pathogenesis of HPH and provide new drug targets and theoretical basis.

长链非编码RNA HOTAIR参与细胞增殖、迁移和分化等各层面的调控，但其在低氧性肺动脉高压(HPH)中的作用尚不清楚。我们前期研究及其他学者的研究发现，PTEN抗HPH的作用依赖于PTEN的甲基化修饰，而HOTAIR有促肿瘤细胞PTEN甲基化的作用，且HOTAIR在低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞中的表达上调。由此，我们推测HOTAIR通过表观抑制PTEN基因表达，促进HPH发生。因此，拟进一步通过构建HOTAIR真核表达载体和siRNA干扰载体，明确过表达或沉默HOTAIR对肺动脉平滑肌细胞增殖、凋亡及迁移的作用，阐明调控HOTAIR表达对PTEN及其下游靶基因表达的影响，并以染色质免疫沉淀技术揭示HOTAIR对PTEN启动子组蛋白H3K27三甲基化的影响；最后通过HPH大鼠模型明确改变HOTAIR表达对肺血管重建的影响及其机制。研究结果将有助于阐明HPH发病机制且为HPH提供新的治疗靶点。

长链非编码RNA HOTAIR参与细胞增殖、迁移和分化等各层面的调控，但其在低氧性肺动脉高压(HPH)中的作用尚不清楚。我们前期研究及其他学者的研究发现，PTEN抗HPH的作用依赖于PTEN的甲基化修饰，而HOTAIR有促肿瘤细胞PTEN甲基化的作用，且HOTAIR在低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞中的表达上调。由此，我们推测HOTAIR通过表观抑制PTEN基因表达，促进HPH发生。因此，拟进一步通过构建HOTAIR真核表达载体和siRNA干扰载体，明确过表达或沉默HOTAIR对肺动脉平滑肌细胞增殖、凋亡及迁移的作用，最后通过HPH大鼠模型明确改变HOTAIR表达对肺血管重建的影响及其机制。研究结果将有助于阐明HPH发病机制且为HPH提供新的治疗靶点。本项目研究发现：（1）体外实验研究了低氧对PASMCs HOTAIR和PTEN表达的影响，揭示了改变HOTAIR表达对PASMCs生物学行为、PTEN及其靶基因表达的影响。明确了HOTAIR通过表观调控PTEN的表达从而影响PASMCs的生物学行为。（2）体内动物实验明确了改变HOTAIR对HPH大鼠的作用，通过转录组测序明确了HPH大鼠和正常大鼠肺组织差异lncRNA表达情况，并进行了验证。我们的研究结果揭示了HPH发生的一种新机制，并为HPH的防治提供了一种新的理论依据和治疗靶点。