C型凝集素受体DC-SIGNR1调控肿瘤微环境中巨噬细胞极化、参与肺癌免疫逃逸作用及其机制研究

肿瘤微环境中巨噬细胞向M2亚型极化在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用，但其具体机制仍未阐明，已成为新的研究热点。我们前期研究表明肿瘤微环境中，DC-SIGNR1信号调控巨噬细胞向M2亚型极化并参与或介导了肺癌免疫逃逸。在前期研究基础上，本项目拟以DC-SIGNR1分子为切入点，应用DC-SIGNR1缺陷鼠及野生型对照鼠，采用流式细胞术、ELISA等方法研究DC-SIGNR1对巨噬细胞极化调控作用；采用混合淋巴细胞反应、流式细胞术、肿瘤杀伤实验等方法从体内、外研究DC-SIGNR1通过调控巨噬细胞向M2亚型极化发挥的肺癌免疫逃逸作用；采用免疫共沉淀、免疫印迹、慢病毒转染等方法探寻DC-SIGNR1调控巨噬细胞极化的信号下游分子及下游分子与其它信号通路相互作用。研究有望阐明肿瘤微环境中巨噬细胞向M2亚型极化及参与肺癌免疫逃逸的具体机制，为明确肺癌发生、发展原因及肺癌免疫治疗提供新的理论和实验依据。

项目背景：肿瘤微环境中巨噬细胞向M2亚型极化在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用，与肿瘤发生、发展密切相关，但其具体机制仍未阐明，已成为新的研究热点。我们前期研究发现肿瘤微环境中，DC-SIGNR1信号调控巨噬细胞向M2亚型极化并参与或介导了肺癌免疫逃逸。主要研究内容：本项目在前期研究基础上，以DC-SIGNR1分子为切入点，应用DC-SIGNR1缺陷小鼠及野生型对照鼠，采用流式细胞术、ELISA等方法研究DC-SIGNR1对巨噬细胞极化调控作用；采用混合淋巴细胞反应、流式细胞术、肿瘤杀伤实验等方法从体内、体外研究DC-SIGNR1通过调控巨噬细胞向M2亚型极化发挥的肿瘤免疫逃逸作用；采用免疫共沉淀、免疫印迹、慢病毒转染等方法探讨DC-SIGNR1调控巨噬细胞极化的下游分子；采用Real-time PCR、基因转染、免疫共沉淀等方法研究下游分子与其他相关信号途径相互作用。重要结果：我们研究发现 1、DC-SIGNR1促使巨噬细胞向M2亚型极化；2、肺癌微环境中，DC-SIGNR1通过调控巨噬细胞向M2亚型极化促进了肺癌细胞免疫逃逸；3、DC-SIGNR1调控巨噬细胞极化的下游分子和信号通路包括miR-27a、NF-κB、ERK1/2、raf-1。研究意义：本研究明确了DC-SIGNR1分子通过巨噬细胞M2亚型极化的调控作用，介导了肺癌细胞的免疫逃逸，并探索了其介导肺癌免疫逃逸作用的分子机制，为肺癌免疫治疗提供了新的理论和实验依据。