以果蝇为模式研究MTF-1在镉诱导的DNA损伤中的作用机制

之前的研究表明，镉等重金属能对包括人在内的生物体DNA造成损伤。我们最近的研究发现，果蝇MTF-1基因的突变会导致DNA损伤，说明MTF-1是维持DNA完整性所必需。目前尚不清楚MTF-1在镉等重金属诱导的DNA损伤与修复中的遗传、分子机制。本项目以经典遗传学材料黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）为模式，利用强大的果蝇遗传学技术，进行果蝇缺失体遗传筛选，获得MTF-1的互作基因，结合分子生物学、生物化学和毒理学等多学科手段对镉在DNA的损伤和修复中的作用机理进行研究，建立镉－MTF-1－果蝇（重金属-基因-生物体）模型，明确MTF-1在介导镉诱导的DNA损伤中的作用及其分子机制，从而揭示重金属诱导的DNA损伤和修复的遗传、分子机制，有助于我们全面理解重金属诱导细胞DNA损伤的信号途径，最终为预防和治疗重金属导致的癌症等疾病提供理论依据。

本项目主要开展了通过利用碱性单细胞凝胶电泳（SCGE）技术，基本完成了2号染色体缺失体的筛选，对部分已分离到的缺失体进行缺失体作图，克隆DMTF-1互作基因，并在研究其互作基因功能基础上研究dMTF-1与互作基因之间的相互作用。目前我们已经通过缺失体作图的方法获得了３个dMTF-1互作基因，同时我们着重针对其中一个基因dP53(人类dP53的同源基因)进行了研究，包括dMTF-1与dP53的突变体重组，即构建了这两个基因的双突变体，研究其遗传上的相互作用及生物化学等水平上的相互作用，研究了其对dMTF-1调控的下游基因mtnA, mtnB, mtnC和mtnD的表达的影响。总体而言，通过该项目的研究，加深了我们对于dMTF-1介导的DNA损伤中的作用及其机理的认识，为今后在研究镉介导的DNA损伤及其机理的研究奠定了重要基础。