LncRNA-NONHSAT188818.1/miR-7153途径调控CD40表达在HBV感染慢性化中的作用及其诊断价值研究

CD40 is an important immune co-stimulatory molecule that may be involved in the chronicization of hepatitis B virus (HBV) infection by mediating immune tolerance, but the exact mechanism has not yet been elucidated. We have previously found that the functional site of the CD40 gene, rs1883832, is associated with chronic HBV infection, but it is unclear how this site affects the chronicity of HBV infection. Further predicted by lncRNASNP software, this site was also found to be located on lncRNA-NONHSAT188818.1, and miR-7153-3p was complementary to the lncRNA and CD40 mRNA. Thus, we propose that the rs1883832-mediated LncRNA-NONHSAT188818.1/miR-7153-3p-CD40 regulatory network is involved in the chronic progression of HBV infection. To confirm this hypothesis, we will examine the expression of lncRNA, miRNA and mRNA, and explore the regulatory mechanism of lncRNA-miRNA-CD40 axis for chronic HBV infection. The results of the study will clarify the role of CD40 in the chronic process of HBV infection and its potential diagnostic value, which is of great significance.

CD40作为重要的免疫协同刺激分子，其可能通过介导免疫耐受参与乙型肝炎病毒（HBV）感染的慢性化，但确切机制尚未阐明。我们前期发现CD40基因上的功能位点rs1883832与HBV感染慢性化相关，但是，该位点是如何影响HBV感染慢性化尚不清楚。进一步通过lncRNASNP软件预测，发现该位点也位于lncRNA-NONHSAT188818.1上，miR-7153-3p能与该lncRNA和CD40 mRNA互补。由此，我们提出rs1883832位点介导的LncRNA-NONHSAT188818.1/miR-7153-3p-CD40调控网络参与HBV感染慢性化进展。为证实这一假说，我们将检测lncRNA、miRNA和mRNA表达，探讨lncRNA-miRNA-CD40轴对HBV感染慢性化的调控机制。研究结果将从新的视角阐明CD40在HBV感染慢性化过程中的作用及潜在诊断价值，具有重要意义。

CD40作为重要的免疫协同刺激分子，其可能通过介导免疫耐受参与乙型肝炎病毒（HBV）感染的慢性化，但确切机制尚未阐明。我们前期发现CD40基因上的功能位点rs1883832单核苷酸多态性与HBV感染慢性化相关，CHB组中TT基因型分布显著高于健康对照组和免疫康复者，在显性模型中也一样，说明CT+TT基因型在CHB组中更常见。除此之外，rs1883832等位基因频率在患者、恢复者和对照组中分布也存在差异。CHB组等位基因T频率明显高于免疫恢复患者和健康对照组。.为了评估CD40与HBV感染状态的关系，我们检测 了50名CHB患者和50名CHB感染后免疫康复患者CD40的表达。实时荧光定量PCR、ELISA以及流式细胞术分别检测患者的CD40 mRNA，血清可溶性CD40 (sCD40)和B细胞上的膜CD40 (mCD40)，我们发现发现CHB组的CD40显著高于免疫康复者.接下来，我们检测了rs1883832不同基因型对CD40表达的功能影响，我们发现CHB组中rs1883832 CC基因型个体CD40 mRNA水平最高，而恢复期患者CD40 mRNA水平差异无统计学意义。除此之外，我们的结果显示CHB和免疫康复组血清CD40高于TT基因型患者，CHB组中CC基因型患者的CD40表达也高于CT基因型。此外，携带等位基因C的个体在各组中CD40浓度较高，提示rs1883232单核苷酸多态性可能影响CD40的表达。.我们在两种肝癌细胞系中过表达CD40，分别在24小时和48小时检测细胞上清HBsAg、HBeAg和HBV DNA表达情况，结果显示，HBsAg、HBeAg和HBV DNA均下调。CC组HBsAg、HBeAg、HBV DNA均低于TT组。.我们还分析了CHB患者CD40 mRNA表达与HBV感染指标的相关性。我们发现sCD40与HBV DNA呈显著负相关，而sCD40与其他临床指标无统计学相关性。特别需要指出的是，我们还发现HBV DNA、HBeAg和mCD40的表达呈负相关。ALT与mCD40表达呈显著正相关。.综上，在我们的研究中，我们发现rs1883832 T等位基因与慢性HBV感染高度相关。rs1883832 CC基因型在HBV感染过程中可能作为潜在的保护性基因型，因其能表达更多CD40，在一定程度上激活宿主适应性免疫反应，在HBV感染中发挥重要作用。