复发性流产病人中血小板微粒对滋养细胞发育能力及胎盘血管生成能力的影响

Recurrent miscarriage (RM) affects 1-3% of couples trying to conceive. In over 50% of cases, the cause of the loss of pregnancy remains unexplained. Impaired trophoblast invasion and microthrombosis of placenta play a major role in the development of RM. The important role of antiphospholipid in non-thrombotic mechanism of RM has been proved in our previous studies. Platelet microparticles (PMPs) have profound effects on cell adhesion, migration, proliferation and survival. The association between PMPs and RM has been evaluated in several studies. But the variations of PMPs in patients with RM are controversial and the exact mechanism about its role in RM is unknown. In this study we will analysis PMPs in RM patients with or without antiphospholipid antibody syndrome through flow cytometry or fluorescence-activated cell sorting technique. PMPs were extracted from the patients’ serum. We plan to co-cultivate PMPs and JEG-3 clone and then further evaluate its role in recurrent miscarriage through animal studies. All these steps are to determine whether PMPs can be used as a serum biomarker for RM and to provide a novel diagnostic biomarker and treatment target for unexplained RM.

复发性流产的发生率约为1-3%，其中原因不明者仍占50%以上。滋养细胞侵袭力下降和胎盘微血栓形成在复发性流产的发病中发挥了重要作用。我们既往的研究证明抗磷脂抗体在复发性流产的非血栓发病机制中发挥了重要作用，最近一个新的与复发性流产相关的标志物—血小板衍生微粒(platelet microparticle,PMPs)引起了学者重视，PMPs影响细胞的黏附、迁移、增殖及存活,在凝血、炎症反应及血管生成中发挥了重要作用。本课题拟通过流式细胞技术和荧光激活细胞分选技术检测有或无抗磷脂综合征的复发性流产病人PMPs的数量变化。提取复发性流产患者外周血中的PMPs，经细胞实验与动物实验探讨PMPs在复发性流产中的具体作用机制，从而为复发性流产的病因学研究奠定基础。

背景：复发性流产（recurrent miscarriage，RM）的病因不明，故RM的发病机制仍是产科的研究热点。本研究的研究对象为自身免疫疾病相关的复发性流产中合并抗磷脂综合征（RM/antiphospholipid antibody syndrome，RM/APS）的患者。RM/APS的发病机制不详，但胎盘功能不足在病理机制中起重要作用。近年来胎盘炎性反应作为新发现的导致胎盘功能不良的诱因受到重视。据报道血小板微粒（platelet derived microparticles, PMPs）可能与不良妊娠结局相关。 PMPs可携带非编码RNA（non coding RNAs, ncRNAs）如LncRNA、miRNA等。目前尚无研究涉及PMPs差异表达的LncRNA对RM发病机制的研究。.主要研究内容: 1.比较RM/APS组与HC组孕6-10周外周血PMPs的数量；2.PMPs的异常激活调控滋养细胞及内皮细胞在RM/APS发病中的作用机制；3.PMPs通过LncRNAs调控滋养细胞在RM/APS发病中的作用机制。.重要结果：1.CytoFlex分析仪对25例 RM/APS患者与17例HC孕妇外周血PMP数量的绝对计数：RM/APS患者与HC孕妇外周血PMP数量无统计学差异；2.RM/APS患者的PMPs 异常激活MAPK信号通路导致炎症反应，导致复发性流产的发生；3.RM/APS患者的PMPs 高表达LncNR_040117，明确了敲除LncNR_040117可下调TNFAIP8L2、抑制炎性反应和改善滋养细胞功能。 .关键数据：在HTR8/SVneo细胞中下调LncNR_040117后细胞的凋亡率显著下降（p<0.01），而增殖（p<0.01）、迁移（p<0.01）及侵袭能力（p<0.001）显著增加； Luminex xMAP显示HTR8/SVneo敲除LncNR_040117后培养上清：空载体组（sh-NC）sTNF-α、sICAM-1及 sVCAM-1较LncNR_040117敲除组（Sh-LncNR_040117）表达量高，有统计学差异（p<0.01, p<0.01, p<0.05）。.科学意义：揭示了RM/APS患者的PMP通过上调LncNR_040117抑制滋养细胞生物学功能参与APS患者发生RM的机制。