复发性流产患者外周血标志物筛选与应用研究

复发性流产(recurrent miscarriage, RM)是妊娠期常见的难治性疾病之一，其中约50%病因不明，本病缺乏特异性强、敏感度高且便于检测的标志物，给疾病的诊断和治疗带来困难。本课题在前期研究复发性自然流产自身抗体的基础上，拟在血清抗体水平、miRNA基因表达调控水平、基因水平全面系统扫查复发性自然流产患者外周血，筛选并鉴定复发性流产患者外周血自身抗体、miRNA、表达基因多态（或突变）及产物，并通过与其它自身免疫性疾病及正常健康人非孕期、各孕期的对照研究，确定复发性自然流产外周血标志物；通过临床大样本盲法验证，并与其它传统检查项目作对比，探讨筛选获得的标志物在自然流产非孕期筛查、孕期监护、妊娠结局及预后预测中的作用，为复发性流产的病因学研究奠定基础，并为这一难治性疾病的提供无创、便捷、快速、准确的诊断标志物和治疗靶点。

本课题在前期研究复发性自然流产自身抗体的基础上，收集了复发性自然流产患者组织标本，构建了绒毛滋养细胞全长cDNA表达文库，应用重组cDNA表达文库血清学分析法筛选了复发性自然流产患者特异性血清蛋白，并发现一些特异性蛋白与血小板微粒密切相关；因此课题组进一步研究了复发性流产患者血液中血小板微粒的含量，并对血小板微粒的功能及其可能的作用机制进行了初步研究；在病例筛选过程中，课题组进行了自然流产患者流产胚胎绒毛染色体核型分析，比较了G显带和微阵列比较基因组杂交技术（aCGH）两种方法的应用价值，结合染色体核型分析结果，分析了自然流产的临床特征。本课题研究证实复发性流产患者具有特异性自身抗体谱，血小板微粒含量变化可能与复发性自然流产发病有关，aCGH技术在检测流产妊娠物核型中具有显著优越性，不同临床表型的自然流产患者流产妊娠物核型表现有差异。