应用连续自由流电泳结合质谱技术分离鉴定卵巢浆液性癌肿瘤标志物的应用研究

在前期工作中通过蛋白芯片飞行时间质谱先后发现了20余个对卵巢癌具有潜在诊断意义（均为p<0.01）的蛋白峰，但由于目前方法鉴定蛋白成功率低，仅成功鉴定了少数几个蛋白，因此，拟在此基础上，以卵巢癌中占50%的浆液性上皮癌的血浆为研究对象，以卵巢交界性、良性浆液性瘤和非卵巢肿瘤病人血浆为对照，利用自由流等电聚焦（FFE-IFE）技术对蛋白组分按等电点加以分离，通过SDS-PAGE电泳和凝胶染色图谱分析，确认卵巢癌特异性蛋白条带，对含量低的特异蛋白可通过多次FFE或加大上样量以及冻干浓缩到达富集的效果，经统计学方法建立诊断模型，对确认的差异蛋白（含量变化超过2倍）进行二级质谱鉴定，明确为何种蛋白，为通过免疫检测验证所获蛋白的诊断价值，用于卵巢癌早期诊断/筛查、手术及化疗效果评价及预测复发奠定基础，也为从蛋白质到基因的逆行途径研究卵巢癌发生机制提供新的线索。