MBL调节白假丝酵母菌相态转化与获得性免疫作用及机制

真菌感染形势日益严峻，深入研究抗真菌免疫意义重大。白假丝酵母菌是临床上最常见病原真菌，其相态转化是感染的关键因素。研究发现"天然免疫的关键分子"-甘露聚糖结合凝集素（MBL）不仅能抑制白假丝酵母菌的酵母相向菌丝相转化，而且存在与酵母相的结合能力高于菌丝相这一现象，据此提出本项目。首先采用高效液相色谱、蛋白免疫印迹、PCR等多种技术分析MBL对白假丝酵母菌细胞壁成分的影响，揭示MBL调节其相态转化关键蛋白和关键基因，阐明MBL调节白假丝酵母菌相态转化的分子机制；进一步以MBL对两种相态白假丝酵母菌的模式识别为切入点，深入剖析MBL对APC分化成熟、抗原提呈及启动获得性免疫应答的影响；再引入MBL与TLR的相互关系来探讨有关信号转导通路，阐明MBL调控白假丝酵母菌获得性免疫机制，提出MBL通过模式识别作用介导并调控白假丝酵母菌获得性免疫应答新观点，为白假丝酵母菌感染的防治提供新思路和新靶点。

真菌感染形势日益严峻，深入研究抗真菌免疫意义重大。白假丝酵母菌（C.albicans）是临床上最常见病原真菌，其相态转化是感染的关键因素。甘露聚糖结合凝集素（MBL）是由肝细胞产生的血浆蛋白，被称为“天然免疫的关键分子”。.本研究首先分析了MBL对C.albicans相态转化的调节作用及机制。显微镜观察发现MBL在早期（2~4h）能够抑制C.albicans酵母相向菌丝相转化；FACS分析表明MBL能够以Ca2＋浓度依赖关系与C.albicans细胞结合；RT-PCR结果表明MBL能够减少C.albicans相态转化调控基因HWP1的表达，但Western-blot并没有检测到减少C.albicans相态转化调控蛋白。证实MBL能够通过调控HWP1的表达抑制C.albicans酵母相向菌丝相转化。.进一步分析MBL对C. albicans诱导的免疫应答调节作用。通过建立体外研究模型，证实低浓度MBL（1mg/L）对DC分化成熟、C. albicans刺激外周血单个核细胞（PBMC）产生的细胞反应均具有促进作用；而高浓度MBL（10-20mg/L）对C. albicans诱导的DC成熟及细胞因子分泌、CD4+T细胞增殖及产生细胞因子、C. albicans刺激THP1细胞产生的炎症反应、DC提呈C. albicans抗原的能力均具有负向调节作用。证实MBL以浓度依赖形式调节C. albicans诱导的免疫应答。.我们又分析了MBL调节C. albicans诱导的免疫应答机制。研究结果显示MBL不仅能够直接作用于TLR2、TLR4受体，还能够抑制C.albicans诱导的TLR2和TLR4表达，阻断TLR2或TLR4受体能够部分抑制C.albicans诱导的免疫反应。MBL能够调节C.albicans诱导的MyD88、TRAF6、p38、ERK、IRAK1等信号分子的表达及磷酸化，还对IκBα的磷酸化及 p65 NF-κB 细胞核移位均具有调节作用。证实MBL通过TLR受体，p38, ERK及 NF-κB 信号途径调节C.albicans诱导的免疫反应。.研究成果揭示了MBL对C.albicans相态转化的调节作用及其分子机制，阐明了MBL对不同相态C.albicans诱导免疫应答的调节作用及其机制，为C.albicans感染的防治提供新思路和新靶点。