多顺反子载体分泌表达血管扩张肽ADM和血管生成肽PR39治疗缺血性心脏病

为探讨多顺反子分泌表达血管扩张肽及血管生成肽，预防和治疗心肌梗死的可行性，本课题设计了通过并接子技术共分泌表达"血管生成总开关"－PR39及肾上腺髓质素ADM重组腺相关病毒，通过选择性冠脉微导管技术，将其转导至有冠脉供血不足和/或具有梗死性倾向的心肌和血管。目的是希望在心肌梗死发生早期，启动ADM分泌表达，快速扩张血管，增加血运，挽救更多"中间地带"缺氧细胞，实现梗死早期缺氧心肌得以修复和再建；在梗死后期可以通过PR39的分泌表达，选择性抑制泛素-蛋白酶体对HIF-1α的降解，来促进血管生成的因子和受体（VEGF、KDR、FLT-1和FGFR-1 ）在组织缺氧时能够持续高表达，并通过PR39具有的抗缺氧应激凋亡作用，保护受损心肌细胞的存活和功能。本课题是探讨使用基因治疗方法，通过ADM和PR39协同表达，来实现预防和治疗心梗及心功能的再建，希望为心脑血管病的预防和治疗寻找新的理论和方法。

高血压病、冠心病、慢性心力衰竭等心血管疾病目前已经成为现代社会中危害人类健康的最常见的几种慢性流行性疾病，随着科学发展，医疗技术进步，心血管系统疾病的发生发展过程、疾病参与因素及治疗成为当今关注热点。本课题是探讨使用基因治疗方法，通过ADM和PR39协同表达，来实现预防和治疗心梗及心功能的再建，希望为心脑血管病的预防和治疗寻找新的理论和方法。通过局部注射的方法将其转导至有冠脉供血不足和/或具有梗死性倾向的心肌和血管。目的是希望在心肌梗死发生早期，启动ADM分泌表达，快速扩张血管，增加血运，挽救更多“中间地带”缺氧细胞，实现梗死早期缺氧心肌得以修复和再建；在梗死后期可以通过PR39的分泌表达，选择性抑制泛素-蛋白酶体对HIF-1α的降解，并通过PR39具有的抗缺氧应激凋亡作用，保护受损心肌细胞的存活和功能。通过前期载体合成验证以及后期离体在体实验验证，共表达PR39与ADM的腺相关病毒载体可以在心肌梗死模型，心肌缺血再灌注模型以及脑缺血再灌注模型大鼠的心肌缺血区以及脑缺血区显著表达PR39以及ADM产物，并可以显著提高梗死后心肌收缩舒张功能，减少心肌梗死面积，显著提高脑缺血再灌注损伤后神经系统评分，减少脑缺血再灌注损伤梗死面积。各项指标显示共表达PR39与ADM的腺相关病毒载体可以实现预防和治疗大鼠心脑缺血再灌注损伤后及心脑功能的再建，可以作为心脑血管缺血性疾病的基因治疗的新的方法。