基于经皮吸收假说的侗药马卡列丙促骨折愈合的药效物质基础和作用机理研究

Fracture, a common traumatic disease in clinics, causes very bad influences on patients' health and daily life, whereas there was a not obvious effect in clinical used drugs. Therefore, the acceleration of fracture healing is one of the most difficult tasks in Orthopedics. Inula nervosa Wall.(Asteraceae family), named Mal Kap liees bienl in Gaeml, is traditionally used as Chinese folk herbs for treating traumatic injury, especially, the accelerating healing of a fracture. Previous studies have been showed there are many kinds of chlorogenic acids analogues, which can promotes rat osteoblast proliferation. Thus, it is high possible to found actively compounds for acceleration of fracture healing from Inula nervosa Wall. Based on serum pharmacochemistry, we proposed an improved hypothesis that constituents after cutaneous absorption from herbs for external use may take effective. The project was studied by phytochemical constituents and the cutaneous absorption constituents were detected and identified based on cutaneous microdialysis and LC-MS at first, then, the cutaneous compounds were target isolated under the LC-MS guideline, finally, the activity and mechanism was tested based on MC3T3-E1 osteoblasts. This project will be very useful to development a medicine in fracture healing, and very helpful to economic benefit on Dong minority.

骨折是临床常见多发的创伤性疾病，愈合时间长，因此，寻找加速骨折愈合的有效治疗药物一直是骨伤科领域的重点课题。侗药马卡列丙（Inula nervosa Wall.）是菊科旋覆花属显脉旋覆花的全草，外敷用于跌打损伤，骨折，可显著缩短骨折病程，前期研究基础表明，马卡列丙中含有大量的绿原酸类成分，文献报道其具有促进成骨细胞增殖的作用。提示：从马卡列丙中发现加速骨折愈合的药物是极有可能的。本研究在血清药物化学的基础上，基于内病外治的外用药-马卡列丙中可加速骨折愈合的有效成分能经皮吸收并发挥作用的假说，首先用经皮微透析和高分辨液质联用技术快速筛选和鉴定马卡列丙的大鼠骨折模型经皮吸收成分，进一步靶向分离经皮吸收成分，再结合细胞模型研究经皮吸收成分的细胞增殖，分化和矿化作用，以明确马卡列丙加速骨折愈合的药效物质基础和作用机制，项目的实施可为开发加速骨折愈合的药物提供理论依据，有助于侗族医药的发展和现代化。

骨折是临床常见多发的创伤性疾病，愈合时间长，因此，寻找加速骨折愈合的有效治疗药物一直是骨伤科领域的重点课题。侗药马卡列丙是菊科羊耳菊属显脉旋覆花的全草，外敷用于跌打损伤，骨折，可显著缩短骨折病程。提示: 从马卡列丙中发现加速骨折愈合的药物是极有可能的。因此有必要研究马卡列丙促骨折愈合的药效物质基础和作用机制。本研究在血清药物化学的基础上，提出基于内病外治的外用药-马卡列丙中可加速骨折愈合的有效成分能经皮吸收并发挥作用的假说，首先采用液质联用技术结合质谱树相似度过滤技术、分子设计和诊断离子技术、排除离子列表技术研究了马卡列丙的化学物质基础，共表征了189个化学成分，均为首次从该植物中发现，其中大多数为绿原酸类成分，并建立了动物模型，采用液质联用技术结合微透析技术研究了马卡列丙经皮给药后透析液的主要成分为绿原酸类成分。然后采用液质联用技术的靶向和系统分离了32个化学成分，鉴定了22个化学成分，其中12个成分为首次从该植物中分离得到。最后对透皮吸收的主要成分绿原酸类成分对成骨细胞MC3T3-E1的增值，分化和矿化的影响进行研究，实验表明异绿原酸A和异绿原酸C具有显著的促成骨细胞增值，分化和矿化的作用。结果表明，基于经皮吸收的假说，可以快速发现马卡列丙促骨折愈合的药效物质基础，为其他内病外治的外用药的药效物质基础的发现提供了新思路和新方法，与此同时，该研究结果，初步阐明了马卡列丙促骨折愈合的药效物质基础和作用机理，为促骨折愈合药物的发现奠定了前期基础，为马卡列丙质量标准的建立和药物的开发提供了实验数据支撑，扩大了侗药的影响力，有利于侗药的发展和现代化，促进民族医药经济的发展。