细胞膜微粒对血管内皮细胞功能的调节作用及其机制研究

The dysfunction/damage of Vascular endothelial cells (ECs) and endothelial progenitor cell (EPCs) is cardiovascular and cerebrovascular diseases common early feature which contributes to the pathogenesis and development of various vascular diseases. Our previous studies suggest that human renin and angiotensinogen ( R+A + ) transgenic mice show EPCs dysfunction, elevated blood pressure, prone to spontaneous intracerebral hemorrhage ( ICH ), circulating microparticles ( MPs ) relate with blood pressure and vascular remodeling. The project will be using flow cytometry, quantitative PCR, mass spectrometry analysis and RNA-Tag sequencing technologies to determine quantity analysis, protein / peptide, mRNA, microRNA and other information of MPs, to study the effects of cardiovascular and cerebrovascular risk factors on ECs and EPCs migration, tube formation, apoptosis, the release of MPs, vascular function effect and relevant mechanism; Using R+A+ transgenic mice to establish hypertension and ICH model, to research the effects of the circulating EMPs, EPC-MPs or infusion of" normal" EPC-MPs on arterial blood pressure, vascular function, vascular remodeling, stroke injury of mice and the related mechanism. Completion of this project, will provid important theoretical basis for the determining whether EMPs and EPC-MPs and related signaling pathways can be a new target for predictive, preventive and therapeutic purposes of cardiovascular and cerebrovascular diseases.

血管内皮细胞 （ECs）和内皮祖细胞（EPCs）的功能异常是心脑血管疾病的共同早期特证。我们前期研究提示人的肾素和血管紧张素原基因(R+A+)转基因小鼠的EPCs功能异常、血压升高，易发生自发性出血性脑卒中（ICH），循环中的细胞膜微粒（MPs）与血压和血管重塑相关。本项目将采用流式细胞术、定量PCR、质谱分析及RNA-Tag测序等技术分析MPs数量、蛋白质/肽、mRNA、microRNA等信息的特征，探讨心脑血管危险因素对ECs和EPCs的迁移、管型形成、凋亡、释放MPs、血管功能的影响及相关机制；以R+A+转基因小鼠建立高血压及ICH模型，探讨循环EMPs、EPC-MPs或输注"正常"的EPC-MPs对动脉血压、血管功能、血管重塑、脑卒中损伤的影响及相关机制。本项目的完成，将为EMPs和EPC-MPs 及其有关信号通路是否能成为心脑血管疾病防治的新靶标提供重要理论依据。

血管内皮细胞 （ECs）和内皮祖细胞（EPCs）的功能异常是心脑血管疾病的共同早期特征。近年来的研究结果表明，在一些心脑血管疾病中循环内皮细胞源的细胞膜微粒（EMVs）增加，EPCs 水平降低。提示它们可能是这些疾病的标记物，可用于疾病的预测。另外，最近的证据显示，细胞微粒（MVs）可携带和传递母细胞的特性和内容物，如蛋白，mRNAs, miRNAs 等到其它细胞。这种新的细胞间相互交流和作用方式说明MVs 还可以具有生理或病理功能。然而，对心脑血管危险因子如何影响MVs 的释放和功能却知之甚少。因此，深入探讨MVs在心脑血管疾病中的作用和机制将有利于进一步了解它们发病的新机制，为这类疾病的防治提供新的理论依据。. 本项目主要采用流式细胞术、纳米颗粒分析技术、定量PCR等技术分析MVs 数量及其中mRNAs、miRNAs 等信息特征，探讨心脑血管危险因素对ECs和EPCs 的功能及释放MVs的影响及相关机制；在动物模型中，探讨循环EMVs、EPCs释放的MVs（EPC-MVs）或输注“正常”的MVs 对血管功能、脑卒中损伤的影响及相关机制。本项目研究结果阐明了血管紧张素II（AngII）、血清饥饿、肿瘤坏死因子alpha（TNFa）等危险因素刺激对EMVs、EPC-MVs所携带的内容物特征的影响；揭示了这些“异常”的MVs及正常条件下产生的MVs能够通过传递其所携带的分子信息影响ECs及EPCs等受体细胞功能，且不同条件下产生的MVs功能不同甚至相反；阐述了循环中MVs 的量和内容物有巨大潜力可以作为心脑血管疾病的评估指标和防治新靶。. 本项目共发表相关SCI论文15篇，获得湛江市科学技术进步一等奖1项。本项目研究结果对及基础及临床研究均有较高的指导意义，项目成果为血管功能调控及卒中研究提供新的方向，可帮助寻找分子标靶，应用于疾病诊断，或开发或筛选新的心脑血管疾病治疗药物，成果的进一步应用将帮助改善心脑血管疾病患者生活质量，减轻疾病为患者及其家庭和社会带来的沉重负担，产生良好的社会和经济效益。