中药五谷虫促进感染创面愈合的有效组分配伍及其相关机制的实验研究

International medical researchers began to pay attention to the special antibacterial effects of Chinese medicine WuGuChong (commonly known as maggots) for serious bacterial infection wound. But most of western research have focused on the clinical study. As Asia's first research group to study WuGuChong antibacterial and biological treatment, in a lot of preliminary work based on originality, we set up the concept of effective content and compatible reaction of WuGuChong for infective wound. In this study, we will do the researches as.follows according to the concept :1)to study the purification skill of peptide and lipid from the body of WuGuChong,on the basis of overall concept of Chinese medicine, will filter out the best compatibility proportion through new type microfliud chip skill;2)to reveal the mechanism of action on the bacteria of antibacterial effective compatible protein content and the mechanism of wound healing of effective compatible lipid content, clarify the target points of the drugs on the infective wound to resolve the problem of "anti-bacterium"and "healing";3)to ehnance the healing and antibacterial activity of WuGuChong ,to afford the scientific support for application of external drug and lay the foundation of business development of "antibacterial and healing drug", in the meaningwhile, to afford the new idea and skill for Chinese insect medicine research.

中药五谷虫，俗称蛆虫，为丽蝇科丝光绿蝇或其近缘昆虫幼虫。目前，五谷虫对耐药菌引起难治性感染创面的治疗作用日益受到国际医学界重视，但研究主要集中于临床，以西方报道居多。作为亚洲率先进行五谷虫抗菌与生物治疗研究的团队，课题组在丰富的前期研究基础上，创新性提出“五谷虫治疗感染创面的有效组分配伍分析理论”。以该理论为依据，本课题将首创性进行如下研究：1)完善五谷虫具有抗菌作用的蛋白组分和促进创面愈合的脂类组分的分离纯化技术，通过新型微流控芯片平台分别筛选出抗菌和促愈合作用的最佳配伍;2)揭示五谷虫最佳有效配伍组分抗菌和促愈合的作用机理，明确配伍组分治疗感染创面的作用靶点，同时解决“抗感染”和“促愈合”两个关键问题;3)从整体上增强五谷虫提取物抗菌和促进创面愈合的功效，实现昆虫类中药复杂有机组分的功能筛选，为五谷虫外用抗菌促愈合药物产业化研发奠定理论基础，为中药昆虫药研究理论和方法开创新思路。

近年来，五谷虫对耐药菌引起难治性感染创面的治疗作用日益受到国际医学界重视，但研究主要集中于临床，相关机制研究较少。本课题在丰富的前期研究基础上，创新性提出“五谷虫治疗感染创面的有效组分配伍分析理论”，并以该理论为依据，完成以下研究工作:（1）完善了五谷虫抗菌肽类组分和脂肪酸组分的分离纯化技术，使用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析鉴定五谷虫有效抗菌与促进愈合成分，以中药整体观理论为基础，实现昆虫类中药复杂有机成分的功能筛选；（2）建立分析五谷虫抗菌与促进创面愈合作用的微流控芯片平台，通过这一平台筛选出五谷虫抗菌肽类组分和最佳配伍脂肪酸组分，为后续实验提供了参考依据；（3）阐明了五谷虫有效配伍抗菌组分对细菌的作用机理：通过与细菌壁和膜的相互作用，破坏细胞表面结构，防止细菌生长和粘附，同时抑制生物膜的形成，甚至根除生物膜。我们的研究有效地表明，五谷虫抗菌肽类有效配伍组分具有作为局部治疗的新型抗菌剂的潜力，将来可作为治疗感染创面的外用软膏制剂；（4）深入探究了五谷虫最佳配伍脂肪酸组分促进愈合的机制：通过促进细胞因子EGF、PDGF和TGF-β1的释放进而激活了AKT1，ERK1/2，p38 MAPK和TGF-β1/Smad3等信号通路。有效地促进了创面愈合相关的细胞增殖、迁移和血管形成，进而加速愈合。为开发利用天然产物对于促进皮肤创面愈合提供了参考和依据，同时为中药昆虫药物研究的理论和方法开创新思路。.目前，通过产学研合作，课题组已初步实现五谷虫抗菌和促愈合主要成分的临床转化应用，并取得了良好的临床效果。主要成分制成的外用膏剂已经可以批量化生产，使得临床糖尿病足溃疡、烧烫伤、压疮等难愈性创面的严重程度得到有效缓解。本课题相关研究成果发表SCI收录论文7篇，获得辽宁省科技进步二等奖1项、大连市科技进步一等奖1项，并获大连市科技成果转化奖，课题负责人入选“兴辽英才”计划科技领军人才、大连市杰出青年科技人才等计划。