miR-146a在狼疮性肾炎治疗中的作用及其机制研究

Lupus nephritis (LN) impacts SLE patients prognosis directly. Because of the limitation of current medicine, We need novel therapies medicine urgently. MiR-146a is closely related to LN. Notch signal pathways involved in the initiation and progression of glomerular disease. NOTCH 2 is a target gene of miR-146a in our previous study. Whether miR-146a could inhibit the notch signaling pathway to ameliorate kidney damage is not yet clear.. In order to make sure the question, we designed a series experiment in our study. . ① To observe the cellular localization and expression level of miR-146a and notch 2 in LN patients renal tissue. Analysis the relationship between miR-146a and kidney injury. . ② In podocyte experiment, after stimulating by serum of LN patients, miR-146a mimic was transfected. Then, podycine, nephrin and expression of molecule in notch signaling pathways were detected. Try to explore podocyte protection mechanism of miR-146a in the molecular level.. ③ MiR-146a agomir was injected by tail vein in MRL/lpr mice. After injection, kidney pathological changes, molecule biomarker of podocyte and expression of molecule in notch signaling pathways were detected. Try to explore mechanism of miR-146a/notch 2 in treating LN. This may supply the new strategy for the therapy of LN.

狼疮性肾炎（LN）直接影响SLE患者预后，目前治疗药物仍有局限性，亟需新的治疗药物。miR-146a与LN密切相关，而notch信号通路参与了肾小球疾病的发生和发展，我们前期研究发现NOTCH 2是miR-146a的靶基因，miR-146a是否通过抑制notch信号通路减轻LN肾脏损伤尚不明确。因此，本研究①观察LN肾组织miR-146a、notch 2细胞定位与表达水平及二者与肾损伤的关系；②使用LN患者血清刺激体外培养小鼠足细胞，转染miR-146a mimic，检测足细胞notch 2信号通路分子及podycine、nephrin表达；③ MRL/lpr小鼠尾静脉注射miR-146a agomir，观察肾组织病理变化，notch 2信号通路相关分子、足细胞分子标记的变化。揭示miR-146a/notch 2在LN治疗中的作用，为LN治疗提供新策略。

狼疮性肾炎（LN）是系统性红斑狼疮（SLE）最常见的表现形式，是导致SLE相关死亡率的重要原因。超过60%的成人SLE患者会发展为LN，大约10-30%的LN患者会在诊断后15年内发展为终末期肾病（ESKD）。目前，大多数LN患者接受类固醇、免疫抑制剂、B细胞调节疗法或钙调神经磷酸酶抑制剂治疗。. 表观遗传缺陷已被证明是导致LN发病的一个原因。因此，参与表观遗传变化的分子近年来在LN的研究中引起了广泛的关注。microRNA调控是一种典型的表观遗传学类型，它在不改变DNA序列的情况下引起稳定的表型变化。鉴于mir-182-5p对肾脏功能有影响。mir-182-5p/FOXO1轴可能是参与多种肾脏疾病发展的关键途径。根据以上背景，我们提出了一个假设，即mir-182-5p/FOXO1轴参与了LN的发生。为了验证我们的假设，我们首先用从LN患者身上采集的血样研究了mir-182-5p和FOXO1的表达状态。分析了LN患者MIR-182-5p或FOXO1与慢性指数（CI）的关系。. 我们通过本研究发现，mir-182-5p抑制FOXO1的表达，FOXO1是肾脏疾病的保护因子，在系统性红斑狼疮患者中上调。因此，我们假设mir-182-5p/foxo1轴的功能失调导致狼疮性肾炎（ln）的发生。首先，我们研究了狼疮性肾炎患者和LN MRL/lpr小鼠生长过程中mir-182-5p和FOXO1的表达。然后，我们给MRL/lpr小鼠注射mir-182-5p拮抗剂，并评估mir-182-5p对肾脏结构和功能的抑制作用。体外应用TGF-β1处理肾细胞系，探讨肾纤维化与mir-182-5p的关系，高慢性指数患者mir-182-5p水平上调，FOXO1水平降低。小鼠狼疮性肾炎的进展与mir-182-5p水平升高和FOXO1水平降低有关。对mir-182-5p的抑制改善了与狼疮性肾炎相关的肾结构和功能损害，同时增加了FOXO1的表达。体外给予TGF-β1可增加肾细胞中mir-182-5p的表达，且呈剂量依赖性。目前的研究表明，在LN患者中，mir-182-5p的表达增加，这有助于抑制FOXO1和LN的发展。