MiR-146a 在大鼠小体积肝移植中的作用

活体肝移植（LDLT）已被公认为解决肝移植供肝匮乏主要途径之一，小移植肝基础研究是LDLT研究重要组成部分。小移植物损伤主要与缺血再灌注损伤，免疫排斥，有效肝容积小等有关。前期研究证实Toll样受体（TLRs）是缺血再灌注损伤和免疫排斥机制上游重要影响因子。Micro-RNA可引起靶mRNA的降解或翻译抑制，从而对基因进行转录后表达调控，进而调控分化，增殖，凋亡，迁移等细胞行为，研究发现TLR/IL-1通路下游两个关键衔接分子，TRAF6和IRAK1可能为miR-146a 的靶标，因此申请人在成功建立大鼠小移植肝模型基础上，采用hFLIP-SiRNA技术下调miR-146a的表达，并采用miR-146a的模拟物上调miR-146a的表达，研究miR-146a对TLRs信号通路的影响及其在大鼠小移植肝模型中的作用，为临床活体肝移植小移植肝保护措施研究提供实验和理论依据

背景及目的：前期研究证实Toll样受体4（TLR4）是缺血再灌注损伤和免疫排斥机制中重要影响因子。微小RNA(micro-RNA)可引起靶mRNA的降解或翻译抑制，从而对基因进行转录后表达调控，进而调控分化，增殖，凋亡，迁移等细胞行为，而TLR/IL-1通路下游两个关键衔接分子，因此申请人在成功建立大鼠小移植肝模型基础上，调节miR-146的表达，从而改变目的基因的表达，研究目的miR-146在大鼠小移植肝模型中的作用。.方法：首先我们研究在小体积肝移植及缺血再灌注损伤模型中miR-146的表达，并且在大鼠肝细胞和巨噬细胞中研究miR-146对目的基因IRAK1 和TRAF6。进一步我们研究采用高动力法尾静脉注射miR-146 mimics，调节miR-146的表达，通过对移植受体/移植物成活时间的影响的分析，病理检查，生化指标，及相应炎症指标的检查，并建立生存时间－累计生存率曲线图，研究基因TRAF6和IRAK1的表达量及miR-146在大鼠小移植肝模型中的作用。.结果：在大鼠巨噬细胞中，我们证实MiR-146a/b通过结合TRAF6和IRAK1的3’UTR端，导致目的基因TRAF6和IRAK1的下调，达到下调TLR4信号通路，进而减轻炎症反应。通过体内研究表明，MiR-146a/b过表达可减轻炎症反应，提高生存时间，对大鼠小体积肝移植的保护作用，在缺血再灌注损伤模型中可减轻缺血再灌注损伤过程中的炎症反应。.结论：MiR-146a/b 可以通过下调TRAF6和IRAK1来减轻缺血再灌注损伤及小体积肝移植损伤。