持续性感染状态沙眼衣原体与宿主细胞高尔基体的三维结构以及相互作用研究

生殖道沙眼衣原体感染是最常见的性传播疾病，衣原体在生殖道的上行感染能够引起女性慢性盆腔炎，导致不孕和异位妊娠。衣原体具有逃避宿主免疫应答机制，在特定条件下始体会形成多核的异常膨大变异体，以持续性感染状态存在，造成慢性和反复感染，给临床防治带来很大的挑战。目前已有学者报道对持续感染衣原体形态和生物特性进行一些研究，但其超微三维结构以及同宿主高尔基体的相互作用研究在国内外都仍是一个空白。本项目拟在我们已用γ-干扰素诱导出衣原体持续性感染状态的基础上，联合应用电镜断层成像技术和激光扫描共聚焦显微镜、免疫荧光技术，对持续感染状态下的变异始体、包涵体以及宿主细胞高尔基体的三维形态结构进行系统的、多分辨的研究，探索高尔基体向衣原体进行类脂运输途径中的重要环节。本项目对衣原体持续感染形成机制、致病机制、以及病原体- - 宿主相互作用关系的研究将会产生重要的影响。

沙眼衣原体是性传播疾病的主要病原体之一, 泌尿生殖道沙眼衣原体持续感染可能与输卵管堵塞、输卵管性不孕、异位妊娠、自发流产等一系列严重的疾病密切相关。 沙眼衣原体持续感染的诊断及治疗难题一直未得到有效解决。本项目使用透射电镜、常温电子断层成像技术、免疫荧光、Western Blotting、构建GFP-GM130质粒转染细胞等方法，对持续感染沙眼衣原体的三维结构、持续感染沙眼衣原体与宿主细胞高尔基体碎片化的相互关系做了一系列的研究，获得以下结果：.(1)利用青霉素建立沙眼衣原体持续感染的细胞模型。.(2)建立体外沙眼衣原体持续感染快速鉴定的方法。与传统的鉴定方法相比，该方法明显地节约了时间，节省了成本，步骤简单、容易实施，为国内普通实验室大量开展沙眼衣原体持续感染的研究提供一定的帮助。.(3)利用常温电子断层成像技术获得持续持续感染的沙眼衣原体（ABs）及急性感染的沙眼衣原体（EBs, RBs）三维结构，并根据该三维结构得到AB外膜最厚， RB外膜厚度最小的结论，即与急性感染状态相比较，持续感染状态的沙眼衣原体E株外膜增厚。.(4)通过对持续感染沙眼衣原体与宿主高尔基体碎片化的关系研究，我们发现沙眼衣原体持续感染对宿主细胞高尔基体的结构和形态并不产生显著的影响，与急性感染不同，沙眼衣原体持续感染并不引起高尔基体发生明显的碎片化。.(5)钙蛋白酶抑制剂Calpeptin抑制Golgin-84的降解，破坏持续感染沙眼衣原体的结构，对其产生彻底的抑制作用。这可能成为衣原体持续感染的药物治疗的一个思路。.已上结果有助于更加深入地理解持续感染沙眼衣原体的代谢、生物学特点，为临床诊断、治疗沙眼衣原体持续感染提供一个新的思路。