泽泻抑制α-葡萄糖苷酶功能因子及其特性研究

泽泻为可用于保健食品的原料，具有降血糖作用。申请者前期研究时首次发现泽泻有强烈的α-葡萄糖苷酶抑制活性。为揭示酶抑制作用，本课题拟采用酶抑制筛选模型进行活性跟踪研究，以生物学指标作为先导，探索泽泻抑制α-葡萄糖苷酶活性的功能因子。具体包括：①依据极性大小将泽泻分成不同部分，经酶抑制模型活性筛选后，将高活性部分采用不同特性层析柱进行分级和富集，构建提取物库。②研究并建立泽泻活性成分高速逆流色谱分离方法，结合酶抑制筛选的生物学指标进行跟踪，确定活性成分。采用现代谱学技术进行化合物结构鉴定。③研究活性成分的酶抑制动力学，考察温度、pH值、作用时间等对其抑制作用的影响。.研究成果可阐明泽泻抑制α-葡萄糖苷酶活性的物质基础，为探索泽泻降血糖作用奠定基础。本研究是采用生物指标为先导的新型分离筛选功能因子的研究模式，可为以后相关保健食品功能因子的研究起到探索和示范作用，有重要的学术意义和推广应用价值。

泽泻为可用于保健食品的原料，具有降血糖作用。课题以α-葡萄糖苷酶抑制活性为切入点，对其降血糖功能因子进行了研究。通过对PNPG法的改良，建立微量筛选模型，对泽泻块茎和梗的提取物进行筛选，发现泽泻块茎提取物中，正丁醇萃取部分（AOB）抑制活性最高。进一步研究发现，AOB对离体小鼠小肠的蔗糖酶和麦芽糖酶有抑制作用，而对猪胰腺α-淀粉酶的抑制作用很小，具有优于目前常用α-葡萄糖苷酶抑制剂阿卡波糖由于有较高α-淀粉酶抑制活性而带来肠道副作用的潜力。通过大鼠离体小肠囊模型实验，发现AOB能抑制小肠吸收葡萄糖。糖负荷小鼠实验中，发现无论1次还是连续10天给予AOB，都能够抑制小鼠餐后血糖。同时发现，连续给予AOB后，可提高小鼠肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活力，降低脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量；可升高正常小鼠血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)，降低甘油三酯(TG)水平，对改善血脂具有积极作用；可升高小鼠血清总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)，降低血清尿素氮(BUN)。应用气质联用（GC/MS） 分析AOB的化学组成，共确认了23个化合物；通过色谱分离，从AOB得到尿嘧啶、胸苷、鸟苷、腺嘌呤、丁二酸5个化合物。酶动力学研究发现，胸苷和鸟苷对α-葡萄糖苷酶表现为竞争性抑制，而尿嘧啶则为反竞争性抑制, AOB为非竞争性抑制。此外，课题还对泽泻多糖、超临界CO2提取物、梗的营养成分进行了研究。