雷公藤多甙调节Th细胞平衡和巨噬细胞浸润早期干预2型糖尿病肾病的机制研究

糖尿病肾病﹙DN﹚是影响糖尿病患者生存质量的主要微血管并发症，循证研究证实："严格控制血糖可减少肾脏并发症的发生，但并不能完全阻止DN的发生和发展"。提示"糖毒性"并不能完全解释DN的成因。肾活检证实：糖尿病肾脏存在大量免疫复合物沉积，揭示了炎症-免疫反应在DN的可能作用。前期临床工作发现，雷公藤多甙可显著降低DN的蛋白尿，但机制不明。结合中西医对雷公藤多甙的认识，我们提出了应用雷公藤多甙早期干预，通过祛风除湿、活血化瘀、舒筋通络以及改善巨噬细胞浸润、调节Th细胞平衡而延缓DN进展的假说。本研究拟以2型糖尿病肾病大鼠为研究对象，应用流式细胞术、实时荧光定量PCR、ELISA法、免疫组化法，探讨雷公藤多甙早期干预对预防2型糖尿病肾病发生、发展的作用及对Th细胞、单核／巨噬细胞的影响，以期明确雷公藤多甙治疗DN的作用途径，同时了解最佳的量效关系，为临床应用提供科学依据。

本项目通过三年的研究工作，已超额完成项目计划内容。糖尿病肾病是糖尿病常见的微血管并发症，现已成为导致终末期肾病的首位原因，其发生、发展与肾小球血流动力学的改变、糖基化终末产物的生成、多元醇代谢通路的异常等因素有关。近年来，越来越多的研究发现DN的发生可能与免疫机制变化引起的慢性炎症反应有关。本研究以高糖高脂饲养联合小剂量链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠为实验对象，以雷公藤多苷为治疗药物，研究发现，1.预防性给予雷公藤多苷药物干预可有效延缓DN的发生发展，糖尿病肾病早期及时给予雷公藤多苷治疗，可减少24h尿蛋白，有效延缓糖尿病肾病的进展。2.应用低、中剂量雷公藤多苷能够预防和治疗早期DN，具有较高安全性，雷公藤多苷高剂量（24㎎/㎏/d）可能会引起肝肾毒性，临床应用雷公藤多苷要注意控制药量，密切观察副作用。3.2型糖尿病大鼠体内存在Th1细胞比例上调及其所分泌的促炎细胞因子增多，以及Th2细胞比例下调及其所分泌的抗炎细胞因子减少介导的迟发型免疫炎症反应可能导致了DN的发生和发展。不同剂量雷公藤多苷可能通过调节血中Th1/Th2细胞比例和其细胞因子的水平以及改善血脂降低大鼠尿蛋白水平；在肾脏中，雷公藤多苷可能通过抑制促炎细胞因子的产生，增加抗炎细胞因子的表达，减轻肾脏局部的炎症反应，改善糖尿病肾病。4.糖尿病大鼠肾脏组织巨噬细胞浸润及相关因子NF-κB、MCP-1、TGF-β1、FN、IL-12、p-STAT4、IFN-γ的表达水平明显上调，雷公藤多苷可改善巨噬细胞在肾脏的浸润及相关细胞因子的表达减轻炎症损伤从而改善糖尿病肾病。5.预防组及治疗组均提示雷公藤多苷中剂量组（12㎎/㎏/d）对于减小24h尿蛋白，改善肾脏病理改变及巨噬细胞在肾脏的浸润及相关细胞因子的表达效果最显著。