新型抗肿瘤双特异性人源化BiTEs的构建及其抗肿瘤作用研究

抗人EGFR鼠/人嵌合抗体Cetuximab（C225）已于2005年批准上市用于晚期结肠癌的治疗。临床研究表明，C225对于肿瘤组织K-ras野生型的肿瘤患者具有较好的疗效，而对K-RAS突变的肿瘤患者疗效不佳。BiTEs(bispecific T cell engagers)是一种新近发展的抗肿瘤/抗CD3双特异抗体，它可以在没有其它共刺激信号的条件下介导静息T 细胞对靶细胞强大的细胞毒作用，且杀伤活性比其他形式的抗肿瘤/抗CD3双抗高出100-10000倍。为克服C225在临床应用中遇到的以上问题并最大程度降低药物的免疫原性，本课题中我们拟将C225进行人源化改造并与抗人CD3人源化抗体组合构建抗EGFR/抗CD3双特异性人源化BiTEs，通过体内外实验考察BiTEs的抗肿瘤尤其是抗K-ras突变型肿瘤作用并阐明其机理，以期改善K-RAS突变型肿瘤患者EGFR靶向治疗效果。

本研究旨在构建一种新型以T细胞作为效应细胞的抗EGFR/CD3的双特异性抗体（bispecific T cell engagers，BiTEs），这种BiTEs能够在没有共刺激的条件下介导静息T细胞对EGFR阳性肿瘤靶细胞的强大细胞毒作用，从而克服临床抗EGFR抗体在治疗K-RAS突变型结肠癌中的耐药。本项目已经按申请书要求完成大部分工作，包括抗EGFR/CD3 BiTEs的构建及体内外活性检测。体外细胞毒实验表明，我们构建的 BiTEs对不仅对K-RAS野生型的EGFR阳性肿瘤细胞有效，而且对于K-RAS及B-RAF突变的肿瘤细胞同样具有强大的杀伤功能。体内动物实验表明，在与PBMC共同输注的情况下，这一新型 BiTEs对接种于NOD/SCID中的K-RAS及B-RAF突变肿瘤具有明显的抑制作用，作用效能是普通抗EGFR抗体的1000倍以上。目前我们正在总结研究成果，撰写文章。