脓毒症调节性T细胞活性增强的分子基础——Foxp3乙酰化修饰变化和机制

调节性T细胞（Treg细胞）在脓毒症病生理过程中发挥重要作用，但其活性增强的机制尚不清楚。已知转录因子Foxp3决定Treg细胞发育和功能，且预试验提示脓毒症Treg细胞Foxp3蛋白乙酰化水平升高，由于蛋白质翻译后乙酰化修饰可增强蛋白的稳定性和功能活性，因此，我们推测Foxp3乙酰化水平上调是脓毒症Treg细胞活性增强的重要机制。为此，本项目首先对比分析脓毒症和假手术模型Foxp3乙酰化变化，及对Foxp3表达、功能和Treg细胞活性等影响，阐示Foxp3乙酰化与Treg细胞活性间的内在联系；进而，结合阻断策略，分析相关乙酰化修饰酶表达、分布及活性等变化；并以组蛋白去乙酰化酶9（HDAC9）为重点，分析PKC和/或CaMK等信号途径在HDAC9和Foxp3乙酰化修饰变化中的作用，阐释导致脓毒症Foxp3乙酰化修饰变化的分子机制，深化对脓毒症免疫发病机制的认识，为脓毒症防治探索提供新思路。

因胃肠道穿孔和(或)坏死导致的腹腔内感染是临床脓毒症的常见病因。感染未能有效清除可导致持久的过度的炎症反应的激活，最终导致脓毒症休克，严重的可引起患者的死亡。TLR4可通过检测丰富的肠道微生物中革兰阴性杆菌的脂多糖而在腹腔内脓毒症中发挥重要作用。TLR4表达于表达于免疫和非免疫细胞的不同亚群，TLR4的功能在不同的细胞类型上表现不同。众所周知，树突状细胞（DC）在检测微生物感染中发挥重要作用，提示免疫系统感染的发生发展，并调节适应性免疫应答。本研究目的在于探究DC表达的TLR4信号途径对于机体腹腔感染所致脓毒症病生理过程的影响和机制。结果表明DC条件性TLR4敲除小鼠盲肠结扎穿孔术（CLP）术后生存率明显改善，细菌清除能力增强。DC条件性TLR4敲除小鼠循环的IL-10水平明显下调，腹腔内多形核中性粒细胞（PMN）高度聚集，且PMN上趋化因子受体2（CXCR2）的表达明显升高。DC和中性粒细胞共培养的体外实验表明DC TLR4依赖分泌的IL-10调节中性粒细胞上CXCR2的表达。我们的研究表明DC上TLR4信号途径在脓毒症中促进IL-10分泌这一之前未知的作用，并通过这一途径抑制多形核中性粒细胞上CXCR2的表达，调节多形核中性粒细胞的募集。我们的发现提示调节DC上TLR4的信号途径可能成为治疗炎症性疾病的新的途径。此外，这些结果和我们之前的研究结果有助于理解先天性免疫受体的多样性和细胞特异性功能在宿主对抗严重感染的重要作用。