心肌细胞超极化激活环核苷酸门控通道重构的氧化还原调控机制

心脏病患者心律失常发生的内在机制主要是心肌细胞电重构，表现为离子通道活性表达及功能的变化。我们研究显示大鼠心梗后心室肌细胞Kv通道电流、mRNA和蛋白表达都显著地减低，并且能够通过激活硫氧还原酶系统（Trx）被逆转。同时，室性心律失常的发生在部分上与超极化激活环核苷酸门控（HCN）通道重构的调控增加相关。HCN2是心室肌细胞HCN通道最主要的亚型。我们初步研究显示氧化刺激引起If电流密度增加，表明HCN2通道也可能卷入氧化还原调控机制。目前Trx系统对HCN2通道的调控机制尚不清楚。我们用新生大鼠评估其心室肌细胞急性损伤后HCN通道重构的氧化还原机制；用腺病毒转染心梗后成年大鼠心肌细胞，使Trx系统过表达或抑制，分析慢性氧化应激引起HCN2通道重构的关联因子。本研究将为氧化应激引起的心肌细胞损伤，导致离子通道重构的调控机制提供新视点，为临床更有效地防治心律失常提供新的理论依据和治疗策略。

按照项目计划书，项目重点集中于急性和慢性氧化应激对大鼠心室肌HCN通道重构调控的内在机制，特别是对通道蛋白重构的氧化还原机制及相关的细胞内信号通路的氧化还原调控机制。研究结果显示1）外源性（H2O2）和内源性（Ang II）氧化应激刺激下，新生大鼠HCN通道蛋白活性增大，c-Src活化，PTPs抑制，以及被Trx氧化还原系统所调控的细胞内信号机制；2）外源性氧化显著增加了成年大鼠心室肌细胞HCN通道表达和电流密度增大，与心律失常的形成和发生有密切的关系；3）细胞内信号通路-转录因子刺激蛋白-1（Sp-1）介导了Trx对HCN通道蛋白表达的调控。根据所得数据，分析结论，汇总资料，撰写论文。研究成果发表在国内中文核心期刊论文9篇，参编论著5部，参加国际学术会议3次，其中应邀发言1次，SCI论文3篇，后续研究成果在陆续投稿中。