基于"久病及肾"探讨维生素D轴在压力超负荷心肌重塑中的时相差异及康心汤干预机制

Myocardial remodeling is the basic pathophysiologic in the occurrence and the development of heart failure.Excessive activation of rennin-angiotensin system ( RAS ) play an important role on myocardial remodeling in heart failure.Actived vitamin D combination vitamin D receptor inhibits renin gene expression at the transcriptional level,and regulation of rennin-angiotensin system to protect the cardiovascular system.Previous studies showed that the intensified kidiney and nourishing qi effectiveness of Kang Xin decoction not only regulate the rennin- angiotensin system in treatment of heart failure,but also regulation the vitamin D axis in myocardial remodeling model.We hypothesis that Kang Xin decoction effect on vitamin D axis regulation the rennin-angiotensin system.In this study wo intends to experiment in vivo and in vitro,using the small RNA interference (siRNA ),detective the phase difference of vitamin D axis and RAS in myocardial remodeling model.Revealed the molecular mechanism of Kang Xin decoction treatment on myocardial remodeling. Interpretation the theory of "Prolonged diseases in volve kidney" in traditional Chinese medicine.To expand the new study field of the tonifying kidney and supply Qi prescription in preventing and treating myocardial remodeling.

心肌重塑是心力衰竭发生和发展的病理生理基础，肾素-血管紧张素系统（RAS）激活在心肌重塑过程中发挥极其重要作用。活性维生素D作用于维生素D受体在转录水平抑制肾素基因表达，从源头抑制肾素分泌而调节肾素-血管紧张素系统，保护心血管系统。前期研究表明具有补肾益气功效的康心汤不仅能调节肾素-血管紧张素系统，同时能调节维生素D轴，抗心肌重塑，有效治疗心力衰竭。由此提出康心汤作用于维生素D轴调控RAS的科学假说。本研究拟从在体实验与离体实验相结合，运用小RNA干扰技术（siRNA），探讨心肌重塑过程中维生素D轴时相差异与RAS变化规律, 揭示康心汤通过维生素D轴调控RAS，抗心肌重塑，治疗心力衰竭的分子机制，诠释中医"久病及肾"的理论价值,拓展补肾益气方药防治心肌重塑新的研究领域。

心肌重构是心衰发生的主要机制，表现为心室的扩张、心室腔的增大，其涉及多种神经内分泌激素、信号通路的改变等多重因素的共同结果。发生心力衰竭时肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）系统处于异常、持续的激活状态, 肾素和血管紧张素生成过多,对血管系统造成多种危害。心脏、肾脏等局部组织的RAS基因转录和表达并不依赖于血液循环中的肾素、血管紧张素转换酶(ACE)及血管紧张素原，可作为一个相对独立的系统，在发挥着作用。维生素D缺乏可诱发RAAS激活，并且进一步诱发高血压，心肌肥厚，从而导致充血性心力衰竭。维生素D能从源头调控肾素的表达，抑制RAAS系统活性。本实验运用具有补肾益气功效的康心汤对压力负荷增加心肌重塑模型大鼠干预，结果表明康心汤能调控压力负荷增加心肌重塑模型大鼠心肌局部及循环RAAS，对心肌组织VDR mRNA、蛋白表达以及Renin mRNA、蛋白表达有一定调节作用。常规HE染色、VG染色及TUNEL染色表明，康心汤改善压力负荷增加大鼠心肌重塑，抑制心肌纤维化，抑制心肌细胞凋亡，具有一定的逆转左室肥厚的干预。进一步通过细胞实验，结合siRNA技术，探讨康心汤成分抑制ET-1诱导的心肌细胞肥大及维生素D轴、肾素等表达。流式细胞检测药物对凋亡的干预作用，显示补肾益气方药具有较好的保护作用。透视电子显微镜观察补肾益气方药具有对细胞超微结构的保护作用。通过本研究发现补肾益气方药可能部分通过调节维生素D轴对肾素的调控达到改善心肌重塑作用。导致心肌重塑发生发展的因素众多，本方药是否还可以通过其他机制来改善心肌重塑，还有待更进一步的研究。同时本课题为中医补肾方药在作用机制上对维生素D轴的调控研究提供一个新的作用靶点。