以CHOP为靶点的小分子激活剂发现及其抗肿瘤活性与机制研究

新靶点的发现和确认是抗肿瘤创新药物发现的关键。CHOP蛋白异常高表达会诱导细胞凋亡，阻滞细胞周期，有望成为新的抗肿瘤靶点。利用建立靶向CHOP转录调控的高通量细胞筛选模型，我们对5.6万个结构多样的天然产物和小分子合成化合物进行了活性筛选，并发现一类结构新颖的小分子CHOP激活剂。研究结果显示，该系列化合物LGH00168在体内、体外均有良好的抗肿瘤活性，且CHOP激活在其抗肿瘤活性中具有重要作用，首次提出直接寻找小分子CHOP激活剂是抗肿瘤药物发现的新途径。本项目拟以LGH00168化合物为切入点，研究其对肿瘤细胞凋亡和CHOP转录激活的调控机制，以期阐明该类化合物的抗肿瘤机制，并进一步对LGH00168进行分子改造和结构优化，在细胞和动物水平评价LGH00168及其衍生物的单独用药及与常用化疗药物的联合用药效果，为发现靶向CHOP的抗肿瘤先导化合物奠定基础。

本项目系统研究了CHOP激活剂LGH00168抗肿瘤活性及其作用机制，发现其在细胞水平以及整体动物水均具有较好的抗肿瘤活性。机制研究显示其促进CHOP基因表达，诱导其下游抗凋亡因子BCL-2的表达下调。SiRNA的方法降低CHOP表达，可以显著恢复BCL-2基因的表达，减缓细胞对LGH00168的灵敏性。此外，进一步的机制研究显示其可以抑制NFκB信号通路，阻断TNF-α诱导的IκB减少，从而抑制P65的入核。此外我们还发现LGH00168可以诱导细胞发现坏死，机制研究显示其诱导的是程序性坏死，被RIP/RIP3的信号通路调控。最后我们发现LGH00168可以诱导线粒体ROS的产生，从而又到了CHOP的转录激活，NFκB信号通路的抑制以及程序性坏死的发生。本研究阶段性成果有望发现ROS-RIP-NF-κB-CHOP信号通路之间的调控新机制，为后续基于此机制的抗肿瘤药物开发奠定基础。在研期间发表相关SCI研究性论文3篇，完成本项目的任务目标。